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文檔簡介
1、。1,臨床免疫學檢驗,仲強,華中科技大學同濟醫(yī)學院診斷學系,2、臨床免疫學檢查、血清免疫球蛋白(Ig)測定、血清補體測定、細胞免疫檢測、感染免疫檢測、自身免疫檢查、肝炎病毒標志物檢測和腫瘤標志物檢測,3、血清免疫球蛋白的分類,Ig通常指具有抗體活性和/或抗體樣結構的球蛋白。免疫球蛋白可通過免疫電泳和超速離心分析分為五類:IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。免疫球蛋白:最豐富或占優(yōu)勢的免疫球蛋白(75%),唯一能通過胎盤的免疫球蛋白。主要由脾臟和淋巴結中的漿細胞合成和分泌。IgA:約10%,SIgA在局部免疫中起重要作用。它主要由腸淋巴組織中的漿細胞產(chǎn)生。4,血清免疫球蛋白,IgM:最高分子
2、量,由5個IgM單體通過J鏈連接。它是最早的免疫球蛋白和抗原刺激后最早的抗體。其殺菌、溶菌、溶血、吞噬和凝集作用比IgG高500-1000倍。測定方法:單向免疫擴散法或免疫比濁法。5,血清免疫球蛋白測定參考值,參考值:IgG: 7.616.6克/升(RID法),IgA: 7103350毫克/升,IgM: 0.482.12克/升,6,臨床意義免疫球蛋白增加多克隆增加:在各種慢性感染中是常見的。單克隆增加:主要見于免疫增殖性疾病,如多發(fā)性骨肉瘤和原發(fā)性巨球蛋白血癥。免疫球蛋白減少在先天性免疫缺陷、獲得性免疫缺陷、聯(lián)合免疫缺陷和長期使用免疫抑制劑的患者中很常見。免疫擴散法測定血清IgD: 0.62毫
3、克/升已經(jīng)發(fā)現(xiàn),一些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和抗“O”抗體是IgD的,但它們的活性很低。血清IgE主要由鼻咽、支氣管、胃腸道等固有層的漿細胞分泌。它是一種嗜細胞抗體,可與肥大細胞和嗜堿性粒細胞膜上的流式細胞儀結合產(chǎn)生型過敏。elasa:0 . 10 . 9毫克/升臨床意義:1 .I型過敏2。IgE骨髓瘤、寄生蟲感染等。3.慢性肝炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎等。9是由單克隆B淋巴細胞異常增殖產(chǎn)生的IgG分子或片段,通常沒有抗體活性。參考值:蛋白質(zhì)電泳,免疫電泳:陰性意義:1。多發(fā)性骨髓瘤(MM),占35%,其中IgG型約占60%;IgA型約占20%;輕鏈型約占15%;IgD和I
4、gE是罕見的。2.巨球蛋白血癥。3.重鏈疾病。4.半分子疾病。5.惡性淋巴瘤。6.良性蛋白尿。血清M蛋白,單克隆免疫球蛋白,10,血清補體測定,補體是一種具有酶活性的熱穩(wěn)定球蛋白,它分為三組:9種補體成分(C1C 9);b、D、P、H和I因素;補體調(diào)節(jié)蛋白,如C1抑制劑、C4結合蛋白和衰變促進因子??傃a體溶血活性(CH50)測定參考值:5000010000 u/L。顯著性:急性炎癥、急性組織損傷、惡性腫瘤和妊娠均有增加。急性腎小球腎炎、自身免疫性疾病、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、慢性肝病、肝硬化、艾滋病、嚴重燒傷等減少。11,血清補體測定,血清C3:主要由巨噬細胞和肝臟合成,在經(jīng)典激活途徑和旁路激活
5、途徑中起重要作用。參考值:0.851.70克/升通過免疫比濁法增加為急性期蛋白,在急性炎癥、早期感染性疾病、急性組織損傷、惡性腫瘤和抑制劑排斥反應中增加。補體合成能力下降;合成原料不足;消耗或損失太多;先天性補體缺乏。12,血清補體的測定,血清C4的測定:由肝臟和吞噬細胞合成,參與補體的經(jīng)典激活途徑。參考值:單向免疫擴散法:0.197/-0.109/升。臨床意義與C3基本相似,多發(fā)性骨髓瘤、IgA腎病、遺傳性C4缺乏癥等也有所下降。.13,血清補體測定和補體C1q測定的參考值:0.1790.04克/升。臨床意義:與C3相似,在活動性混合結締組織病、嚴重營養(yǎng)不良、腎病綜合征、嚴重聯(lián)合免疫缺陷病等
6、中也發(fā)現(xiàn)了該下降。b因子測定-C3活化劑前體。14、細胞免疫試驗、淋巴細胞表面標記試驗、T淋巴細胞表面標記試驗:E花環(huán)形成試驗、免疫熒光(IFA)、熒光激活細胞分類(FACS)、免疫金銀法、免疫酶染色等。e玫瑰花結形成試驗SRBC CD2參考值Et 64.4%6.7%免疫熒光,檢測表面標志物。15、T和T淋巴細胞,可用于計數(shù)T淋巴細胞、分類T淋巴細胞亞群和判斷T淋巴細胞活化程度。CD3分子在所有成熟T淋巴細胞表面表達,是總T淋巴細胞的重要標志。CD3在甲狀腺功能亢進、淋巴細胞性甲狀腺炎、重癥肌無力和器官移植后排斥反應中很常見。CD3主要存在于免疫缺陷病中,如艾滋病、先天性胸腺發(fā)育不全綜合征和聯(lián)
7、合免疫缺陷病。也可見于惡性腫瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、免疫抑制療法等。成簇分化CD3代表總的T淋巴細胞,CD4是輔助和誘導T細胞的標志,CD8是抑制和殺傷T細胞的標志。用單克隆抗體和熒光標記的二級抗體在熒光顯微鏡或流式細胞儀下計數(shù)鎘的百分比。參考值:IFA): CD3為63.1.8 %;CD4為42.8%9.5%。CD8 19.6% 5.9%;CD4 /CD8為(2.20.7)/1。流式細胞術:CD3 61%;CD4 28X %;CD8 19H %;CD4 /CD80.92.0/1 .17、T細胞分化抗原試驗、臨床意義CD3 CD4 T細胞下降在某些病毒性傳染病中很常見,如艾滋病、MCV病、嚴重創(chuàng)傷
8、、全身麻醉、大手術、應用免疫抑制劑等?;顒悠陬愶L濕性關節(jié)炎發(fā)病率升高。CD8 T細胞下降在類風濕性關節(jié)炎、干燥綜合征、重癥肌無力、糖尿病(型)和膜性腎小球腎炎中很常見。在傳染性單核細胞增多癥、MCV病和慢性乙型肝炎的急性期升高.CD4 /CD8比值下降,這在艾滋病、瘤性麻風、惡性腫瘤的分期和復發(fā)中較為常見。在傳染性單核細胞增多癥、MCV病、血吸蟲病等傳染病中也發(fā)現(xiàn)了這種病毒。在活動性類風濕性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、重癥肌無力、膜性腎小球腎炎和器官移植后的排斥反應中發(fā)現(xiàn)了這種增加。18,淋巴細胞功能試驗,T細胞轉(zhuǎn)化試驗形態(tài)學方法:T細胞轉(zhuǎn)化率60.1%7.6% 3H-TdR摻入法:用
9、液體閃爍計數(shù)器測定培養(yǎng)的淋巴細胞,并記錄每分鐘脈沖數(shù)。SI(刺激指數(shù))=PHA刺激管的平均cpm=對照管的平均CPM。SI2顯著,而SI2是淋巴細胞轉(zhuǎn)化率的降低。19、T細胞轉(zhuǎn)化試驗,具有判斷機體細胞免疫功能水平的臨床意義,并降低那些常見的細胞免疫缺陷或細胞免疫功能低下,如惡性腫瘤、淋巴瘤、重癥肺結核、肝硬化等。唐氏綜合征中升高是常見的。為了估計疾病的療效和預后,表面標記。20,檢測到B淋巴細胞。表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22、CD40和其他表面受體:B細胞抗原受體(BCR)、細胞因子受體(CKR)、補體受體(CR)和Fc受體。B細胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B細胞
10、的特征性表面標志。通過檢測針對不同類型免疫球蛋白的熒光標記單克隆抗體,b細胞可分為smIgg、SmIgM、SmIgA、SmIgD和SmIgE。21,B淋巴細胞表面標記物檢測,參考值:免疫熒光(綿羊抗人)(以攜帶該標記物的細胞百分比表示):SmIg細胞總數(shù):平均21% (16 (%) smig細胞:平均7.1% (4%) smim細胞:平均8.9%(7%)SMig細胞:平均2.2%(1%4%) SmIgD細胞:平均值為0.9% (0% 1.5%)。檢測到。22,B淋巴細胞表面標志物,SmIg細胞增多的臨床意義:常與B細胞惡性增殖有關,主要見于慢性淋證、毛細胞白血病和巨球蛋白血癥。SmIg細胞的減
11、少主要與體液免疫缺陷有關,這在性免疫球蛋白缺乏和嚴重的聯(lián)合免疫缺陷病中很常見。檢測B淋巴細胞表面標記物,測定B細胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22參考值:FACS:CD19細胞11.74%3.73%臨床意義CD19是所有B細胞的共同表面標記物,在B細胞系統(tǒng)惡性腫瘤中增加,在體液免疫缺陷病中減少。24、自然殺傷細胞可直接殺死效應細胞,具有抗腫瘤、抗感染和免疫調(diào)節(jié)功能,還參與移植排斥、自身免疫性疾病和超敏反應。乳酸脫氫酶釋放法參考值細胞毒性指數(shù):27.55.5% 51Cr釋放法參考值自然殺傷細胞活性(自然殺傷率):47.68%,2020年8月14日,25、活性降低在惡性腫瘤、嚴重的聯(lián)
12、合免疫缺陷病、艾滋病和免疫抑制劑患者中很常見。評價腫瘤療效和預后時,自然殺傷細胞可釋放細胞因子如干擾素、干擾素和粒細胞集落刺激因子。27、乙肝病毒血清標志物的檢測、HBeG、抗-HBe或抗-HBe HBeG、抗-HBc或抗-Hbc: ELASA、RIA、HBsAg、抗-HBs或抗-HBS、28,檢測乙型肝炎病毒血清標志物,HBsAg()表明,在肝臟中發(fā)現(xiàn)了HBV?。阂倚透窝椎臐摲诤图毙云?。慢性遷延性肝炎,慢性活動性肝炎,肝硬化,肝癌。慢性乙型肝炎表面抗原攜帶者。抗HBs或抗HBs:中和抗體。29,乙肝病毒血清標志物檢測,HBeAg:患有乙肝,這是病毒復制活躍和傳染性強的標志;持續(xù)陽性容易轉(zhuǎn)變
13、為慢性肝炎;乙型肝炎表面抗原和乙型肝炎表面抗原可以垂直傳播??挂腋尾《净蚩挂腋尾《荆撼霈F(xiàn)在急性感染恢復期,持續(xù)時間長。這意味著HBV被部分消除或抑制,復制減少,傳染性降低。30,乙型肝炎病毒血清標志物,抗-HBc或抗-HBc:一種反映HBV對肝細胞侵襲的指標,主要包括IgM、IgG和IgA???HBc IgM陽性是最早的特異性抗體,是診斷急性乙型肝炎和判斷病毒主動復制的指標,提示患者的血液具有高度傳染性。它也見于慢性活動性肝炎???HBc抗體陽性滴度高,表明其患有乙型肝炎并被感染;低滴度是先前感染的指標,在體內(nèi)需要很長時間。31,HBV血清標志物,HBV-脫氧核糖核酸的定性和定量測定:目前的定
14、量測定范圍是102108拷貝/毫升。綜合評價乙型肝炎表面抗原、抗乙型肝炎表面抗原、抗乙型肝炎表面抗原、抗HBC及聯(lián)合檢測的臨床意義。32、丙型肝炎病毒標志物檢測,抗丙型肝炎病毒抗體陽性在急性丙型肝炎感染中較為常見,是診斷丙型肝炎的早期敏感指標;它是丙型肝炎病毒活性的指標和丙型肝炎病毒傳染性的指標。反轉(zhuǎn)錄巢式聚合酶鏈反應和熒光定量聚合酶鏈反應檢測抗丙型肝炎病毒抗體(第三代試劑抗原包括丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒;丙型肝炎病毒容易變異,抗丙型肝炎病毒陽性轉(zhuǎn)化的時間也大不相同。33,血清抗鏈球菌溶血素“O”的測定,參考值:乳膠凝集(LAT): 500 U含義:
15、這種增加常見于A組溶血性鏈球菌感染的相關疾病,如扁桃體炎、感染性心內(nèi)膜炎、風濕熱、鏈球菌感染后的腎小球腎炎等。A組溶血性鏈球菌感染后1周開始增加,46周達到高峰,持續(xù)數(shù)月或數(shù)年。假陽性和假陰性。34、傷寒沙門氏菌和副傷寒沙門氏菌的免疫測定,肥達反應參考值O凝集值1: 80,傷寒沙門氏菌H凝集值1: 160,副傷寒沙門氏菌A、B、C凝集值1: 80,副傷寒沙門氏菌抗體IgM測定參考值ELASA法:陰性或效價1: 20。傷寒沙門氏菌和副傷寒的免疫測定,臨床意義O升高,H正常,O升高,H升高,O升高,甲、乙、丙升高。36、血清C反應蛋白測定,C反應蛋白是由肝臟合成的一種急性期反應,可與肺炎球菌的C多
16、糖反應。參考值:8.2毫克/升(免疫比濁法)。重大組織損傷,如大手術、嚴重創(chuàng)傷、燒傷、心肌梗塞等。發(fā)病數(shù)小時后迅速增加,好轉(zhuǎn)后迅速下降。增加再次表明繼發(fā)感染或深靜脈血栓形成。風濕熱活躍期,可達200毫克/升以上.細菌感染經(jīng)常明顯上升,而病毒感染不明顯或輕微上升。惡性腫瘤、器官移植后排斥、妊娠等??擅黠@增加,在疾病發(fā)作后數(shù)小時內(nèi)可迅速增加,然后在病情好轉(zhuǎn)后迅速降至正常。37,腎綜合征出血熱病毒抗體檢測,參考值IFA,ELASA:陰性特異性IgM-在感染后23天檢測,并在710天達到峰值。特異性IgG在感染后兩周出現(xiàn),并持續(xù)多年。艾滋病血清學檢查和抗艾滋病病毒(型或型)檢測是艾滋病診斷的主要指標。該抗原是艾滋病毒感染的T細胞株的病毒抗原(HLA-DR抗原污染可導致假陽性)。方法:初篩試驗ELASA法、乳膠凝集法、免疫印跡法和斑點免疫滲濾法。蛋白質(zhì)印跡試驗和聚合酶鏈反應可以用來檢查艾滋病毒的基因。用人類免疫缺陷病毒抗原檢測P24抗原(具有群體特異性的病毒衣殼蛋白)。艾滋病病毒核酸檢測;核糖核酸聚合酶鏈反應。39、梅毒血清學檢查是一種由梅毒螺旋體梅毒亞種引起的性傳播疾病。梅毒螺旋體抗體檢測:非梅毒螺旋體抗原試驗和梅毒螺旋體抗原試驗,前者是篩查試驗和治療效果監(jiān)測,后者是確診。暗視野顯微鏡下聚合酶鏈反應檢測梅毒螺旋體,測定甲胎蛋白,參考值CLI
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