【畢業(yè)學位論文】（Word原稿）我國防治鴿禽流感的相關措施碩士學位論文正文

中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 目錄 1 目 錄 第一章 引言 . 流感 概論 . 1 流感病毒病原學 . 1 流感病毒生態(tài)學 . 3 流感臨床表現(xiàn) . 5 流感引起禽類的病理變化 . 5 流感與流感大流行 . 6 感病毒唾液酸生物學 . 8 研究的目的和意義 . 14 第二章 型禽流感病毒對鴿的致病性實驗 .料與方法 . 15 毒分離株 . 15 驗動物 . 15 驗中常用化學試劑 . 15 關試劑的配制 . 16 染用毒株雞胚半數(shù)感染量（ 測定 . 16 驗鴿血清學背景調(diào)查 . 16 腔感染實驗 . 16 染鴿病理組織學和免疫組織化學檢驗 . 17 染鴿拭子病毒滴定 . 18 染鴿組織病毒滴定 . 18 果 . 19 毒的純化與增殖 . 19 胚半數(shù)感染量（ 定結(jié)果 . 19 驗鴿血清學背景調(diào)查 . 19 實驗室感染 流感病毒后的臨床表現(xiàn) . 19 實驗室感染 流感病毒后的剖檢病變 . 20 06. 21 喉頭和泄殖腔拭子病毒滴定結(jié)果 . 25 臟器病毒滴定結(jié)果 . 26 居陰性對照鴿試驗結(jié)果 . 26 染后 21 天血清轉(zhuǎn)陽測定結(jié)果 . 30 論 . 30 國禽流感病毒對鴿的致病性 . 30 傳播禽流感病毒的可能性 . 32 第三章 感染試驗鴿分離毒株受體特異性位點序列分析 .材料與方法 . 33 中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 目錄 2 料 . 33 傳演化分析 . 34 結(jié)果 . 36 體結(jié)合特異性位點的序列分析 . 36 討論 . 40 染鴿分離株與原病毒受體特異性氨基酸位點比較 . 40 第四章 哈爾濱 市 鴿 型禽流感流行學調(diào)查 材料與方法 . 43 查地點 . 43 本量的設計 . 43 的采集 . 43 需試劑 . 44 子和血清的采集 . 44 5型禽流感病毒的檢測與分離鑒定 . 44 流感病毒血清學調(diào)查結(jié)果 . 45 結(jié)果 . 45 5型禽流感病毒檢測結(jié)果 . 45 5型禽流感病毒血清學調(diào)查結(jié)果 . 46 討論 . 46 爾濱市鴿的禽流感病毒感染狀態(tài) . 46 前 禽流感主動監(jiān)測中應用的主要診斷方法的優(yōu)缺點 . 46 前活禽市場潛在的公共衛(wèi)生安全隱患 . 48 國防治鴿禽流感的相關措施 . 49 第五章 總結(jié)論 51 研究結(jié)論討論 . 51 題 . 51 參 考 文 獻 52 致謝 人 簡 歷 59 中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 1 第一章 引言 禽流感（ 由正黏病毒科 A 型流感病毒引起的一種禽類的感染和 /或疾病綜合癥。根據(jù)病程長短和家禽臨床表現(xiàn)等，禽流感可分為高致病性禽流感和低致病性禽流感。 家禽流行的高致病性禽流感（ 突然發(fā)生、癥狀嚴重及病程短，易感動物死亡率接近 100 。作為禽流感病毒的自然宿主，野生 水禽感染低致病性流感病毒（ ，能以一種平衡的狀態(tài)與這些宿主共存，呈亞臨床經(jīng)過（ 1992； 2000）。低致病性禽流感病毒（ 由儲存宿主傳播給雞、火雞等易感家禽時引發(fā)的特異性轉(zhuǎn)移，感染家禽一般僅呈現(xiàn)感輕微癥狀。然而，如果家禽能耐受若干次循環(huán)感染，這些毒株將可能發(fā)生一系列突變以適應新的宿主。 一些家禽 （ 家鴨、鵪鶉和鴿等 ） 已知 對這些病毒有抵抗力，并且可能是這些病毒的無癥狀攜帶者，從而擔當 沉默的宿主 ，使傳播繼續(xù)存在。 甲型流感病毒 型不但可以調(diào)節(jié)自身以適應宿主，而且有可能通過插入突變的方式轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N高致病禽流感病毒（ ，從而導致嚴重的致死性疾病。這種高致病禽流感病毒可能是由感染了 歷經(jīng)感染而存活的禽鳥可通過口腔分泌或在糞便中排泄病毒長達 10 天，從而促進病毒進一步傳播。涉及飼養(yǎng)禽群與野水禽直接或間接接觸成為本病流行的潛在因素 ,活禽鳥市場也在流行病的傳播方面發(fā)揮了重要作 用。 在 2003年中期開始侵襲東南亞地區(qū)家禽、野生鳥類和人類，現(xiàn)已傳播到非洲和歐洲的高致病性 嚴重的一次暴發(fā)。以往高致病性禽流感在家禽和野生鳥類中的暴發(fā)十分罕見。自 2003年 12月，在非洲、亞洲、歐洲和中東地區(qū)，大約 45個國家報告了 或野生鳥類中的爆發(fā)。 目前禽流感不僅因其帶給家禽養(yǎng)殖業(yè)巨大經(jīng)濟損失而受到人們的關注。在最近的爆發(fā)（ 1997年香港， 2003年荷蘭）以前，人感染禽流感病毒鮮有報道，即使感染，也只會導致輕微發(fā)病。高致病性 一，從 1997年 12月起，發(fā)現(xiàn)病毒已經(jīng)在人群中導致嚴重疾病，約有 300多例病例，死亡率達 55%；第二，更值得關注的是，如果有更多機會，變成對人類具有高傳染性的類型并在人與人之間傳播。 發(fā)展成引發(fā)流感大流行的毒株。 涉及飼養(yǎng)禽群與野水禽直接或間接接觸成為本病流行的潛在因素 ， 活禽鳥市場也在流行病的傳播方面發(fā)揮了重要作用。 流感 概論 1 . 1. 1 禽流感病毒病原學 中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 2 早期以“雞瘟”命名的高致病性禽流感，最早 于 1878年在意大利被發(fā)現(xiàn)，并認定為是一種可感染鳥類和雞的傳染性疾?。?1878）。本此病多發(fā)于意大利 又被稱作 1901年意大利科學家 到 1955年 型流感病毒。 禽流感（ 由正黏病毒科 或疾病綜合癥。正粘病毒科有 4個屬：甲型流感病毒屬 ()、乙型流感病毒 屬()、丙型流感病毒屬 () 及托高土病毒屬 (2003年病毒分類專家建議，在正粘病毒科增設鮭傳貧病毒屬 (成員為感染魚類的鮭傳染性貧血病毒 ( 感染馬、豬、貂、海豹、鯨、禽及人， 型流感病毒感染人、犬與豬，但極少引致嚴重的疾病。托高土病毒是以蜱為媒介的蟲媒病毒，感染家畜及人類，在非、歐 、亞洲發(fā)現(xiàn)。 流感病毒 , 單股負鏈 態(tài)具有多形性，呈球形或桿狀，有包膜，基因組分為 8個節(jié)段。每個片段長度在 890到 2341個核苷酸之間（ 2006）。病毒顆粒呈球狀或桿狀結(jié)構(gòu)，直徑 80到 120橫斷面看，流感病毒體像一對稱的意大利辣香腸匹薩餅，中間為環(huán)狀意大利辣香腸切片，周邊平衡分布著其他七個切片（ 2006）。流感病毒屬正粘病毒科，根據(jù)核蛋白和基質(zhì)蛋白抗原性的不同，分為甲型、乙型和丙型。禽流感病毒屬于甲型流感病毒。 甲、乙型流感病毒包膜表面具有明顯的刺突，主 要由 白組成。脂質(zhì)層包裹著由 白組成的基質(zhì)；病毒包膜為脂質(zhì)雙層膜，來源于病毒感染的細胞。核衣殼蛋白包被的 8個獨立節(jié)段組成的基因組，與核衣殼蛋白一起構(gòu)成核糖核蛋白復合體（ 蛋白的抗原性穩(wěn)定，具有型的特異性，是流感病毒分型的基礎。與 個 A) 構(gòu)成活性的 要負責病毒的復制和轉(zhuǎn)錄，具有核酸內(nèi)切酶活性，并與核糖核蛋白復合體（ 連。 促進感染細胞 內(nèi)病毒成分組裝。流感病毒的轉(zhuǎn)錄及 帽的細胞 端被用作 胞漿膜出芽成熟釋放。病毒復制過程中常產(chǎn)生缺損性干擾顆粒及基因重配。 圖 1甲型流感病毒結(jié)構(gòu)圖。 （ 德國 ） 國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 3 甲型和乙型流感病毒的主要抗原表位是跨膜糖蛋白血凝素（ A）和神經(jīng)酰胺酶（ N 或 血凝素鑲嵌于病毒包膜內(nèi)，是由 562 566個氨基酸組成的、已被糖基化和?；牡鞍住Ｆ湮挥诎ね鈧?cè)的呈刺突狀的球形頭部與細胞受體結(jié)合有關，該細胞受體由末端為神經(jīng)氨酸衍生物的寡聚糖組成（ 1994）。 導產(chǎn)生中和抗體的主要中和抗原，可結(jié)合宿主細胞上的病毒受體。 在子代病毒出膜時釋放位于被感染細胞表面的子代病毒。該功能不僅可以避免釋放過程中病毒的聚集，而且還可能有助于病 毒穿透上皮組織的粘液層以完成對細胞的吸附（ 2004a）。神經(jīng)酰胺酶的這個特性也使其成為一個值得研究的抗病毒藥物靶標（ 2004）。病毒的 者相互協(xié)調(diào)地發(fā)揮作用是病毒有效吸附和釋放的關鍵（ 2002）。二者可誘導亞型特異的免疫反應，從而在各個不同的亞型內(nèi)產(chǎn)生完全保護，而在亞型間只能產(chǎn)生部分交叉保護。 跨膜糖蛋白血凝素（ A）和神經(jīng)酰胺酶（ N）抗原性都不穩(wěn)定，是流感病毒亞型劃分的依據(jù)。根據(jù)糖蛋白抗原性的差異，目前將甲型流感 病毒分為 16個 9個 從系統(tǒng)發(fā)生學角度， 和 獲結(jié)果也為上述分類提供了佐證（ 2005）。 按照一般的命名規(guī)則，流感病毒的名稱中應當包括流感病毒的型別、宿主種類（若是感染人則可省略此項）、分離地區(qū)、序列號和分離年份。對于甲型流感病毒，還應當以括號的形式標明血凝素和神經(jīng)酰胺酶亞型。引起最近爆發(fā)的禽流感的病毒為 譜系，其親代毒株是從中國廣東省的一只鵝體內(nèi)分離到的，因此將其命名 為 A/（ 1999）；從香港第一例感染 (（ 1998） 。 與所有有囊膜的病毒一樣，抵抗力不強。 對諸如去污劑等脂溶劑（氯仿、乙醚、丙酮等）的滅活比較敏感。福爾馬林、氧化劑、稀酸、羥胺、十二烷基硫酸鈉和銨離子能迅速破壞其傳染性。病毒對熱比較敏感。當流感病毒被加熱到 56 并持續(xù) 30分鐘，或者被加熱到 60 并持續(xù) 10分鐘，如果被加熱到 65 至 70 時只要幾分鐘時間即 喪失活性。紫外線直射病毒可以依次破壞其感染力、血凝素活性和神經(jīng)氨酸酶活性。流感病毒直射在陽光下 40至 48小時即可失去活性。 在雞胚中增殖的疫苗毒，因受雞胚尿囊液中蛋白質(zhì)的保護較為穩(wěn)定。 大多數(shù)禽流感病毒株只在受感染禽鳥的呼吸道和胃腸道中而不是在 肌肉組織 中發(fā)現(xiàn)。但是，現(xiàn)有研究表明，高致病性病毒，例如 乎傳播至受感染禽鳥的各個部分，包括 肌 肉 組織 。禽流感病毒可在受污染的生禽肉中存活，因此可通過新鮮或冷凍肉等受污染食物的銷售和流通傳播。 流感病毒生態(tài)學 野生水鳥，特別是雁形目（鴨和鵝）、 鷗和岸禽類成員，最有可能是甲型流感病毒的天然貯存宿主，攜帶所有型別的甲型流感病毒 (1992； 2003； 2004；2004)。幾乎所有鳥類對流感病毒都易感，有些家禽類如雞、火雞、幾內(nèi)亞雞、鵪鶉和雉雞感染病毒后均容易發(fā)病。一般來說，甲型禽流感病毒并不會導致自然宿主發(fā)病，而是與宿主維持一種進化意義上這個突變比表明，流感病毒的進化保持著單純性（ 國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 4 1992； 2005）。亞臨床感染的宿主與病毒間似乎存在一種穩(wěn)定的彼此 耐受的平衡狀態(tài)，在臨床上表現(xiàn)為宿主沒有癥狀而病毒卻能高效復制。每克鳥類的排泄物可攜帶雞胚半數(shù)感染劑量（ 度易感的家禽感染病毒后，即便是野生型病毒，都會發(fā)病。這種表型的病毒也稱為低致病性禽流感，一般來說只會使家禽的產(chǎn)蛋量有暫時的小幅降低，或者使肉類家禽的體重有所下降（ 2001）。 然而， 7型毒株則有可能在傳播后突變?yōu)橐环N高致病的形式，并適應新的家禽類宿主。由于在野生鳥類體內(nèi)從未觀察到這種高致病形式的 其它亞型的病毒（ 998），因此有人甚至會認為這種高致病形式的禽流感病毒是人造的，并且只可能是人造病毒與自然平衡系統(tǒng)相互作用后造就的結(jié)果。 在水 鳥中，感染部位主要在腸道，隨水傳播，而且無癥狀。東南亞的家養(yǎng)鴨 是甲型流感病毒的主 要宿主，這些鴨 在 2004） 。在泰國，數(shù)量有關，與當?shù)氐?不同家養(yǎng)禽類 、濕地及人類也有 一定關系。當?shù)剞r(nóng)民常年在生產(chǎn)雙季水稻的濕地上用撒落的稻谷放養(yǎng)鴨 ，很明顯，這是高致病性禽流感維持和傳播的關鍵因素（ 2006）。 一 旦家禽中出現(xiàn)高致病性禽流感病毒，它們就會平行地從家禽回傳給野生禽類。野生禽類對高致病性禽流感病毒所致疾病的易感性顯著依賴于鳥的種類、年齡和毒株。在亞洲譜系的 致病性禽流感病毒只會偶爾感染野生禽類并且有嚴格的地域限制，因此，從流行病學的角度來講，野生禽類對高致病性禽流感病毒的傳播并無重要作用。然而自 2005年初這個判斷可能從根本上改變了。 2005年初，中國西北地區(qū)的青海湖自然保護區(qū)內(nèi)，數(shù)千只水鳥爆發(fā)流行了 病毒又在 2005 年進一步向歐洲傳（ 2005）。 分泌物、糞便、死禽尸體污染的任何物體均可以機械性傳播疫情。病禽消化道及糞便中的禽流感病毒會在空氣中傳播 ,通過消化道、呼吸道、皮膚損傷和眼結(jié)膜而傳染其他禽類。昆蟲以及各種攜帶病毒的鳥類也可傳播疫情。帶毒的種蛋也可出現(xiàn)垂直傳播。候鳥遷徙是遠距離散毒的主要途徑。 清和蛋殼上均分離出了 使 作為傳播媒介也是可能的。哺乳動物和其他動物應當考慮為 為在 人、豬、雞、火雞身上分離的有些毒株非常相近，而且通常存在于禽類的 貂、鯨也存在。有些動物也許本身并不易感，只是通過共同水域或同在一起飲食而形成機械傳播。對家禽來講，人是最主要的機械傳播者。觀賞鳥的進出口也是一種重要傳播途徑，英國、美國、澳大利亞和日本等國都先后從進口觀賞鳥中分離到 氣傳播在鄰近養(yǎng)殖場之間有可能起一定作用。昆蟲通過接觸污染的糞便也有可能機械傳播 都缺乏實驗證據(jù)。多數(shù)研究者認為養(yǎng)殖場之間的人員及設施的流動是最主要的機械傳播途徑。 流感主要通過感染者咳嗽 和打噴嚏時從鼻腔和咽部噴出的霧滴（直徑大于 5m）在人與人之間傳播。這種小的顆粒不能保持懸浮在空氣中，所以需要近距離（將近 3切接觸才能傳播。直接的皮膚與皮膚接觸或間接的接觸呼吸道分泌物（接觸污染的表面，然后接觸眼睛、鼻子或嘴）也可以傳播。個體可以在癥狀出現(xiàn)前 2天到癥狀出現(xiàn)后大約 5天傳播流感病毒。兒童可以傳播 10天或更長時間。 中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 5 無論是通過呼吸道感染還是腸道感染，病毒傳播似乎都與釋放出來的病毒數(shù)量相關。以在感染過程中幾乎沒有排毒過程。水可能是重要的傳播媒介，鳥和水禽的糞 便是重要的傳染源。高致病性禽病毒可以在環(huán)境中存活很長時間，尤其在低溫環(huán)境（如污染了糞便的水中）。在水中， 22 時病毒可存活 4天，而 0 時可存活 30天。在冰凍物體中，病毒可能無限期存活。最近的研究顯示， 2004年分離的 37可以存活 6天，而 1997年流行中分離的病毒僅能存活 2天（ 20041029）。 至今成功的人工感染途徑有：氣溶膠、鼻內(nèi)、竇內(nèi)、氣管內(nèi)、口、眼結(jié)膜、肌肉內(nèi)、腹腔內(nèi)、靜脈內(nèi)、泄殖腔和腦內(nèi)接種各種不同的流感病毒。 流感臨床表現(xiàn) 禽流感通常有數(shù)天的潛伏期（ 但極少數(shù)可達 21天）。潛伏期之后，根據(jù)分離株的特征 、感染的病毒量 、 毒株類型及禽類育齡的不同，禽流感的臨床表現(xiàn)多種多樣，臨床癥狀也不確定 (2005)。因此，不可能僅根據(jù)臨床表現(xiàn)對禽流感進行診斷。 感染低致病性禽流感病毒后，癥狀可能有個體差異，如羽毛散亂、無光澤，產(chǎn)蛋量暫時減少，采食量下降、體重減輕并伴隨輕微的呼吸系統(tǒng)疾病 (2001)。一些低致病性毒株，如已經(jīng)適應家禽體內(nèi)高效復制的亞洲譜系 能會導致更為明顯的癥狀以及更高的死亡率 (2003； 2005)。 感染高致病性禽流感病毒后，雞和火雞的患病特征為突發(fā)性、且病情嚴重， 48小時內(nèi)病死率達 100% (2000)。病毒在感染種群中的傳播與其飼養(yǎng)方式有關：放養(yǎng)式飼養(yǎng)的種群以森林中的植被為食，可能直接接觸病毒并與多種動物混合生存。因此，流感在放養(yǎng)種群中的傳播速度要快于圈養(yǎng)的種群，但仍需數(shù)天時間才能完全傳播開來 (000)。通常只有一部分特定的種群受到影響。許多鳥類無任何征兆地死亡，以至于開始的一段時間里，往往懷疑鳥類是因中毒而死 (2005)。值 得注意的是，一株特定的高致病性禽流感病毒可能只誘發(fā)一種禽類產(chǎn)生嚴重的疾?。?1997年在香港的活禽市場經(jīng)歷毀滅性的打擊前， 20%的雞體內(nèi)存有 僅有 鴨和鵝體內(nèi)存在該病毒。而其它所有的雞形目，燕雀目和鸚鵡目物種體內(nèi)的病毒檢測結(jié)果均呈陰性，而且實際上也只有雞最終發(fā)病 (1998)。 在工業(yè)化的家禽養(yǎng)殖基地內(nèi)，家禽的飲水及進食量在逐漸減少后又突然增加，產(chǎn)蛋期的家禽停止產(chǎn)蛋，可作為其發(fā)生系統(tǒng)性疾病的征兆。感染了高致病性禽流感病毒的鳥類常表現(xiàn)為反應呆滯和行動遲緩， 還可能會出現(xiàn)諸如頭部無羽毛部位發(fā)生浮腫，鳥冠、下顎垂肉和腿部發(fā)紫，綠色水樣便及呼吸困難等癥狀。產(chǎn)蛋期的禽類起初會產(chǎn)外殼變軟的蛋，但隨著病情的發(fā)展，產(chǎn)蛋會迅速停止。而對該病毒欠敏感的禽類如鴨、鵝及行禽類的癥狀主要表現(xiàn)在神經(jīng)系統(tǒng)，包括震顫、姿勢反常（斜頸）和行動協(xié)調(diào)方面出現(xiàn)問題（運動失調(diào)）。在 1979年德國爆發(fā)的一次高致病性禽流感期間，鵝會不自主的在池塘內(nèi)游成一個窄圈。這些鵝也成為第一個顯著的并最終導致人們懷疑其患高致病性禽流感的諸多征兆之一。 流感引起禽類的病理變化 中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 6 低致病性禽流感（ 對機體的損傷因毒株及宿主的年齡和種類不同而改變。一般來講，只有火雞和雞表現(xiàn)出大體和微觀上的病理損傷，特別是那些已經(jīng)適應宿主的病毒導致的機體損傷更是如此 （ 2001） 。感染后的火雞可檢測到鼻竇炎，氣管炎及肺泡炎，雖然細菌的二次感染也有助于這些炎癥的產(chǎn)生。有報道火雞還可患胰腺炎。而雞類感染后最常見的癥狀是呼吸道產(chǎn)生輕微損傷。此外，損傷也集中于生殖器官的表層（卵巢，輸卵管，卵黃性腹膜炎）。 禽類感染高致病性禽流感（ 的特有病變是腺胃和腹部脂肪出血，有時在胸骨內(nèi)面甚至全身組織發(fā) 生出血性病變；頭、眼瞼、肉垂、頸和胸等部位的水腫組織呈淡黃色；肝、脾、肺等臟器常有灰黃色小壞死灶；腹腔和心包有充血和積液。 過急性（機體在感染后 24見于一些雞形目的物種）和急性疾病沒有大體病理學 的改變，已報告的癥狀包括如下幾個方面：心包積水離散分布，輕微腸內(nèi)出血以及偶爾出現(xiàn) 小腸系膜和心包漿膜淤血（ 2003a； 2004）。感染了亞洲譜系 毒的雞有時會出現(xiàn)痔斑，氣管中積存大量粘液（ 2004），也可能出現(xiàn)體腔滲出液及肺水腫。過 去教科書中經(jīng)常描述的胃粘膜微出血僅見于感染了 型病毒的家禽中（ 2004）。在全身不同的組織中均可見各種組織學損傷（ 1997），并可檢測到病毒抗原。病毒最先出現(xiàn)于上皮細胞，之后在心肌層，腎上腺和胰腺中可觀察到病毒感染的細胞。神經(jīng)細胞及腦神經(jīng)膠質(zhì)細胞也可被病毒感染。就發(fā)病機理講，流感病毒的發(fā)病過程可能類似于內(nèi)皮細胞傾向性病毒，在這個過程中，激活的內(nèi)皮細胞和白細胞可導致細胞因子釋放出現(xiàn)系統(tǒng)性紊亂，從而更易導致心肺組織或多器官衰竭（ 2000； 005）。 在 病癥遲發(fā)型和病程延長的動物中，常見的病癥為神經(jīng)系統(tǒng)疾病和組織學上的非化膿性腦損傷。然而，從其它器官中也可分離到病毒（ 2002a； 2005）。該病癥已見于經(jīng)實驗室感染亞洲譜系 ，鴯鹋及其它物種。而產(chǎn)卵期鳥類出現(xiàn)的癥狀為卵巢和輸卵管炎癥及隨后出現(xiàn)的卵泡破裂，也稱卵黃性腹膜炎。 研究發(fā)現(xiàn)，病毒在鴨、鷗和家雀體內(nèi)的復制受到限制。這些鳥類只表現(xiàn)出癥狀輕微的間質(zhì)性肺炎、肺泡炎，也會偶發(fā)淋巴細胞和組織細胞心肌炎（ 2002a； 2003）。 子和椋鳥可抵抗 而， 5誘發(fā) 16只中的 5 只鴿子出現(xiàn)因非化膿性腦炎引發(fā)的延遲性神經(jīng)系統(tǒng)癥狀（ 2006）。 流感與流感大流行 1970 年 豬群中查到 型抗體并分離到類似病毒； 1976 年在美國新澤西州發(fā)生古典豬流感病毒在人間流行；而在歐洲的豬群中又發(fā)現(xiàn)了禽源 株；1989 年間，有學者首次從馬群中分離到 禽源 感病 毒，并證實了馬流感病毒 因來源于禽的流感毒株。這些現(xiàn)象提示人們，甲型流感病毒有可能在一定程度上發(fā)生不同宿主，即人、禽、馬、豬等動物之間直接的或間接的相互傳播，這也是甲型流感病毒發(fā)生變異和新亞型起源的重要條件。 自從 1959 年以來，只是偶爾發(fā)生人感染禽流感病毒；在數(shù)百種甲型禽流感病毒株中，中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 7 已知只有四種可以引起人類感染： 200601） 。 除了 感染一般只引起輕微癥狀，很少有嚴 重病癥 （ y 2003； 2004） 。 對于 毒，密切接觸死鳥或病鳥（比如屠殺、掏內(nèi)臟、售肉、制備）或在場地接觸禽類糞便都可能是人感染的主要途徑 (200601)。 由于病毒中 此流感病毒極易發(fā)生突變，每個復制周期內(nèi)突變率高達 5 x 10意味著每個基因組在一個復制周期內(nèi)就要有一個核苷酸發(fā)生突變 （ 1993） 。如果病毒在宿主體內(nèi)復制的過程中選擇壓力（如中和抗體、受體結(jié)合處于次佳條件及化學抗 病毒藥物）起作用的話，那么與之對應的有選擇性優(yōu)勢的突變株就會被篩選出來，并成為該宿主體內(nèi)病毒的優(yōu)勢毒株。假如 么這個過程就稱為抗原漂移（ (2003)。 抗原 轉(zhuǎn)變 (指在一個復制周期內(nèi)抗原決定族突然發(fā)生重大變化的現(xiàn)象，即 H 和 N 亞型發(fā)生轉(zhuǎn)變。當細胞同時感染兩種或兩種以上不同的甲型流感病毒亞型后這種現(xiàn)象就會發(fā)生。由于病毒基因組區(qū)段向子代病毒的分配與每個區(qū)段的來源無關，因此就會 產(chǎn)生攜帶有不同親代病毒遺傳信息的子代病毒（即所謂的重組體） （ 2004； 005)。 1957年 （ 和 1968年 （ 的流感大流行正是由人類和禽類病毒的重組引發(fā)的，而 1918年的西班牙流感則是由禽類流感引起的。 目前，盡管通過感染的家禽接觸病毒比較普遍，但是人類感染 說明限制這種禽病毒傳播的種屬屏障仍然較高 盡管已經(jīng)流行了將近10年。然而，在過去幾年中， 2004)，一些克隆具有更廣泛的結(jié)合特性，這反映了一定程度的對人類宿主的適應性 (2005)。 002） ，而且也擴大了哺乳動物宿主范圍，可以自然地感染人、虎、豹子、家貓和石貂（ 2004； 2005； 2006） 。 2002； 2004）。最近顯示，鴨 對高致病性 以高達 17天 (2005)。 在中國中部， 2005年 4月 下旬，青海湖自然保護區(qū)有超過 6000只遷徙候鳥死于 之前，野生鳥類死于高致病性禽流感病毒極為罕見 (20050818)。新分離自不同地方的病毒（青海湖、尼日利亞、伊拉克、土耳其、俄羅斯、哈薩克和蒙古）具有一致且顯著的變異，從而使這些病毒對鳥和小鼠具有更高的致死性。這樣長時間的基因穩(wěn)定性是很少見的，而且，很可能說明這種高致病性病毒現(xiàn)在至少已經(jīng)適應某些種類的遷徙水禽，并且在進化平衡中與這些水禽共存，并 對其不造成明顯的傷害，伴隨這些鳥類沿著它們的遷徙路線傳播 （ 20060220） 。 2005年在泰國中部進行的一項尚未公布的研究中，檢測的 629只狗中 160只呈抗 2006） 。一般認為家貓對流感有抵抗力。然而，當給貓喂食感染 會出現(xiàn)嚴重病癥并能將病毒傳染給其他貓 （ 2004） 。貓可能不僅可以通過呼吸道排毒，也可能通過消化道排毒 （ 2006） ，這意味著在哺乳動物宿主內(nèi)和宿主間可能是通過潛在的、新的傳播途徑傳播病毒。 在 2006年 2月，在德國雷根島的家貓(20060228)和石貂 (20060309)體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了 此前兩個星期中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 8 當?shù)赜?100多只野鳥死亡。 2003年和 2004年的人 997年 的 2005） 。 高致病性禽流感會給家禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失，然而，近來禽流感受到世界范圍內(nèi)的廣泛重視的原因不僅在于此。新近發(fā)現(xiàn)的一株高致病性的 997年以前就在中國南方出現(xiàn)，現(xiàn)已在東南亞的禽類中穩(wěn)定存在，并已經(jīng)從鳥 類傳播到哺乳動物（貓，豬及人類），這表明該病毒已經(jīng)出人意料的突破了種屬屏障（ 2003）。盡管此前也有人感染禽流感病毒的報道（ 2004； 2005），但人類已被感染、感染者病情嚴重且已有死亡的事實，已經(jīng)讓人們擔心可能會爆發(fā) 2004； 2006）。一系列事件表明， 此引發(fā)的全世界公眾對 也就不足為奇了（ 2005）。 感病毒唾液酸生物學 唾液酸位于 經(jīng)不同方式進行修飾。 位碳上可連接 成 5連接羥基可形成 端 5位碳上連有 唾液酸 7、 8、 9（即 基、 的羥基都可以被其他基團取代。唾液酸種類多樣性取決于第 2位碳與糖鏈連接的 常見的唾液酸糖鏈末端是唾液酸 2- (2與 唾液酸 21- (2- 6)）。 唾 液 酸 結(jié) 構(gòu) 多 樣 性 調(diào) 控 唾 液 酸 對 不 同 結(jié) 合 植 物 血 凝 素 的 識 別 ， 如 流感病毒血凝素。 流感病毒可與宿主細胞膜上唾液酸糖鏈受體結(jié)合。在自然條件下可與流感病毒結(jié)合的受體分子至少存在 40種，包括 5 5各種 5報道的有 15種）；其中 在 過天然或合成的 100余種唾液酸糖鏈的結(jié)合特異性研究發(fā)現(xiàn)， A 2)1)1型和 半乳糖苷鍵的神經(jīng)節(jié)苷脂。末端唾液酸殘基是必需基團，但是唾液酸相鄰蛋白氨基酸序列和連接糖鏈內(nèi)部半乳糖的唾液酸，如 能被識別。流感病毒可特異性識別選擇性唾液酸糖鏈和唾液酸分子類型。 表達的 群鏈球菌可在 4 發(fā)生血凝作用，而且該血凝作用可被具有 一實驗現(xiàn)象說明，唾液酸 甲型流感病毒通過成熟的 蛋白三聚體附著于細胞表面，吸附分為不同的層次，此過程是通過識別受體末端不同類型的唾液酸（ 次末端與半乳糖連接的不同的糖苷鍵、以及細胞表面唾液酸寡聚糖內(nèi)部區(qū)段的組分來完成的 (995； 2005)。不同流感病毒宿主的特定組織表達多種唾液酸寡聚糖。病毒 A 糖蛋白針對某一宿主的特異受體類型而做出的適應性改變，對于病毒的有效復制至關重要 （ 1999； 2001； 1999和 2001； 2000； 國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 9 2004） 。這意味著病毒經(jīng)種間傳播后， 白的受體結(jié)合部位要發(fā)生形態(tài)上的變化（ 2006） 。 圖 1述了甲型流感病毒受體的偏好特性。禽流感病毒普遍對 2是因為該型唾液酸是易感宿主內(nèi)源性上皮組織（腸道，肝臟）的主要受體（ 2005a； 2005） 。與此相反，人流感病毒主要對人呼吸道無纖毛上皮細胞上以 2種受體的偏好性也屬于種間屏障的范疇，該屏障可阻止禽流感病毒以非經(jīng)口方式傳播給人 （ 2000； 2005） 。然而最近發(fā)現(xiàn)，在人氣管中存在著有纖毛的上皮細胞，該細胞帶有密度較低的與禽流感受體類似的糖配體 （ 2004b） ，而雞的細胞中也存在低密度 的人源性唾液酸受體 （ 005） 。這也解釋了為什么人仍有感染某種禽流感病毒的可能性 （ 1991） 。這兩種類型的受體均以較高密度的形式存在于豬及鵪鶉體內(nèi)，因此也使這些物種成為禽流感和人流感病毒的感染對象 （ 1994； 1998； 1998； 2001； 2003； 005） 。 圖 1型流感病毒受體偏好特性一覽（ 005） 、留鳥和禽流感 世界上現(xiàn)存的鳥類有 27目 175科 9200多種（ 1991）。其中在中國有分布的鳥類計 21目 81科 1244 種（鄭作新， 1994）， 占世界鳥類種數(shù)的 右，中國是世界鳥類分布種數(shù)最多的國家之一；在動物地理區(qū)劃上中國地處古北東洋兩界，這在世界上也是絕無僅有的。我國有遷徙行為的鳥類占全國鳥總數(shù)的 鴿亦稱家鴿（ 鵓鴿，鴿子的祖先是野生原鴿，屬鴿形 目（ 鳩形科（ 早在幾萬年以前，野鴿成群在海岸險巖和巖洞峭壁筑巢、棲息、繁衍。據(jù)有關史料記載，早在 5000 年以前，埃及和希臘人已把野生鴿馴養(yǎng)為家鴿了。公元前 3000 年左右，埃及人就開始用鴿子傳遞書信了。我國家鴿飼養(yǎng)的中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文 第一章引言 10 歷史也由來已久?，F(xiàn)在全世界已有 1500 多個家鴿品種，根據(jù)用途可分為食用鴿（又稱肉鴿）、觀賞鴿和信鴿等三大類。 國肉鴿養(yǎng)殖業(yè)現(xiàn)狀 我國養(yǎng)鴿歷史悠久，但肉鴿飼養(yǎng)作為商品生產(chǎn)，還是 70 年代才發(fā)展起來的。在本世 紀初的美國，由于經(jīng)濟繁榮，人們生活消費層次普遍提高，膳食結(jié)構(gòu)起了根本變化，鴿肉就已經(jīng)開始進入賓館、俱樂部等公開場所。隨著對乳鴿營養(yǎng)價值的進一步認識，西歐及東南亞的一些國家的居民也養(yǎng)成了吃鴿肉的習慣，出現(xiàn)了 以鴿代雞 的趨勢。鴿肉細嫩味美，為血肉品之首。經(jīng)測定，乳鴿含有 17 種以上氨基酸，氨基酸總和高達 且含有 10 余種微量元素及多種維生素，因此鴿肉既是高蛋白、 低脂肪的理想食品，又是高級滋補營養(yǎng)品。 我國隨著經(jīng)濟發(fā)展，人民膳食結(jié)構(gòu)的調(diào)整，國內(nèi)的肉鴿消費也逐年增大。香港每年肉鴿需求量都在 1000 萬只以上 ，高峰年份全年肉鴿消費竟達 1 億只。 80 年代以后，肉鴿業(yè)發(fā)展迅猛，已成為畜牧業(yè)中的熱門。我國南方沿海地區(qū)因具有得天獨厚的地理優(yōu)勢，上海、廣東率先開始引進、飼養(yǎng)和發(fā)展肉鴿養(yǎng)殖，使我國肉鴿養(yǎng)殖由東到西，從南到北，迅速發(fā)展起來。各地賓館、飯店不斷推出以肉鴿為特色的菜肴，使其需求量不斷增加，當今肉鴿已不是人們陌生的食品了。僅廣州、深圳市場乳鴿銷量已超過 300 萬只，北京、上海、天津等大城市的需求量超百萬只。國內(nèi)市場的日趨拓寬，消費水平的不斷提高，進一步刺激了肉鴿業(yè)的發(fā)展，存欄量成倍增長，并進入全面性的商品化生產(chǎn)，飼養(yǎng)管 理水平亦達到先進水平。據(jù)不完全統(tǒng)計，我國目前注冊登記的鴿場已到 700 多家，種鴿飼養(yǎng)量 250 萬對以上（ 。 肉鴿具有飼養(yǎng)管理簡單、養(yǎng)殖成本低、適應性強、飼養(yǎng)周期短等特點。肉鴿飼養(yǎng)業(yè)發(fā)展呈逐年擴增的趨勢。原因有三：一是國內(nèi)市場