乙肝兩對半標準操作規(guī)程POS

1、乙肝五項（乳膠法）操作規(guī)程POS1。檢測目的乙型肝炎病毒標志物（HBsAgHBsAbHBeAgHBeAhHBcA功檢測。2.測定原理HBsAg檢測采用雙抗體夾心法原理，試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T區(qū)）的抗體.檢測時，標本滴入試劑加樣處，標本與預包被的乳膠顆粒（即標記物）結(jié)合的HBsAb（即標記抗體）反應，該結(jié)合物隨之在毛細效應下向上層析。如是陽性，乳膠抗體（標記抗體）在層析過程中先與標本中的HBsAg結(jié)合，隨后結(jié)合物會被固定在T區(qū)膜上的HBsAb捕獲，形成HBsAb標記抗體一HBsAg-HBsAbS合物，從而在T區(qū)形成一條紅杠。如為陰性，則T區(qū)沒有紅杠.HBsAb檢測采用雙抗原夾心法原理

2、，試劑含有事先固定于膜上測試區(qū)（T區(qū)）的HBsAg檢測時，標本滴入試劑加樣處，標本與預包被的乳膠顆粒結(jié)合的HBsAg反應（即標記抗原）反應，該結(jié)合物隨之在毛細效應下向上層析.如是陽性，乳膠抗原（標記抗原）在層析過程中先與標本中的HBsAb結(jié)合，隨后結(jié)合物會被固定在T區(qū)膜上的HBsAg捕獲，形成HBsAg標記抗原-HBsAb-HBsAgM合物，從而在T區(qū)形成一條紅杠.如為陰性，則T區(qū)沒有紅杠。HBeAg檢測采用雙抗體夾心法原理.試劑含有事先固定于膜上測試區(qū)（T區(qū)）的HBeAb檢測時，標本滴入試劑加樣處，標本與預包被的乳膠顆粒結(jié)合的HBeAb反應（即標記抗體）反應，該結(jié)合物隨之在毛細效應下向上層析

3、。如是陽性，乳膠抗體（標記抗體）在層析過程中先與標本中的HBeAg結(jié)合，隨后結(jié)合物會被固定在T區(qū)膜上的HBeAb捕獲，形成HBeAb標記抗原-HBeAg-HBeAbft合物，從而在T區(qū)形成一條紅杠。如為陰性，則T區(qū)沒有紅杠。HBeAgHBcAb采用競爭抑制法原理，試劑含有事先固定于膜上測試區(qū)（T區(qū)）的抗體。檢測時，標本滴入試劑加樣處，隨之標本在毛細效應下向上層析.如標本中含有相應的抗體，則同膜上測試區(qū)（T）的單克隆抗體競爭，與預包被在乳膠顆粒上的相應抗原反應。如標本中沒有相應的抗體，則預包被在乳膠顆粒上的相應抗原與膜上測試區(qū)（T）的單克隆抗體全部結(jié)合。陽性標本，測試區(qū)（T）將沒有紅色條帶；陰性

4、標本，測試區(qū)（T）會出現(xiàn)明顯的紅色條帶.3。標本采集樣本采集后應盡快分離血清或血漿以避免溶血。檢測進應盡量使用新鮮的樣本。樣本若不能及時送檢，可在28C冷藏3天。長期保存需冷凍于-20C,忌反復凍融。發(fā)臭、溶血等異常樣本請勿使用.4 .試劑艾博生物醫(yī)藥有限公司5 .操作步驟5。1使用前將試劑板和血清/血漿標本恢復至室溫（2030%）.從原包裝鋁箔袋中取出試劑盒（注意：在扣開鋁箔前應先恢復至室溫）,在1小時內(nèi)應盡快地使用.5.2 將試劑盒置于干凈平坦的臺面上，用吸管吸取血清/血漿標本，逐滴垂直加入于試劑板的五個加樣子L中（每孔2-3滴）。5.3 加樣后立刻開始計時，等待紅色條帶的出現(xiàn)，在15分鐘

5、時讀取測試結(jié)果。在20分鐘后讀取的結(jié)果無效。6。結(jié)果判定由于前三個項目HBsAgHBsAbHBeAg使用雙抗體（原）夾心法原理，后兩個項日HBeABHbcAb使用競爭法原理。因此前一：個項日與后兩個項目判讀方法是不同的，請注意區(qū)別。6.1。HBsAgHBsAhHbeAg6。1。1陽性（十）:兩條紅色條帶出現(xiàn)。一條于測試區(qū)（T）內(nèi)，另一條位于質(zhì)控區(qū)（C）。陽性結(jié)果表明：標本中含有待測物質(zhì)。6.1。 2陰性（-）:質(zhì)控區(qū)（c）出現(xiàn)一條紅色條帶，在測試區(qū)（T）內(nèi)無紅色條帶出現(xiàn)。陰性結(jié)果表明：標本中檢測不出待測物質(zhì)。6。1。3無效:質(zhì)控區(qū)（c）未出現(xiàn)紅色條帶，表明不正確的操作過程或試劑盒已經(jīng)變質(zhì)損壞。

6、在此情況下，應再次仔細閱讀說明書,并用新的試劑盒重新測試。如果問題仍然存在，應立即停止使用此批號產(chǎn)品，并與當?shù)毓搪?lián)系。6。1。4注意:在進行HBsAgHBsAbHbeAg測試時，測試區(qū)（T）內(nèi)的紅色條帶可顯現(xiàn)出顏色深淺的現(xiàn)象。只要在規(guī)定的觀察時間內(nèi)，不論該條帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應該判為陽性結(jié)果。6。2.HBeAbHBcAb6。2。1陽性（+）:僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紅色條帶.在測試區(qū)（T）內(nèi)無紅色條帶出現(xiàn)。陽性結(jié)果表明：標本中含有待測物質(zhì).6。2。2弱陽性（+）:質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紅色條帶，在測試區(qū)（T）內(nèi)有非常弱的紅色條帶出現(xiàn)。陽性結(jié)果表明：標本中含有待測物質(zhì).6。2。3

7、陰性（一）：兩條紅色條帶出現(xiàn).一條于測試區(qū)（T）內(nèi)，另一條位于質(zhì)控區(qū)（C陰性結(jié)果表明：標本中檢測不出待測物質(zhì).6.2。 4無效:質(zhì)控區(qū)（C）未出現(xiàn)紅色條帶，表明不正確的操作過程或試劑盒已經(jīng)變質(zhì)損壞.在此情況下，應重新測試。如果問題仍然存在，應立即停止使用此批號產(chǎn)品，并與當?shù)毓搪?lián)系。7.質(zhì)量控制7。1請控制判讀時間，測試結(jié)果應在測定開始后20分鐘左右讀取，30分鐘后讀判定無效。7.2質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C區(qū)）一條紅色條帶的出現(xiàn)是試驗結(jié)果可靠的前提。質(zhì)控內(nèi)（C）所顯現(xiàn)的紅色條帶是判定標本是否足夠，層析過程是否正常的標準，同時也作為試劑的內(nèi)控標準.8。注意事項8。1乳膠法乙肝五項檢測試劑板（血清/血漿）只

8、是定性的篩選乙肝病毒血清標志物的存在，不能確定血樣中病毒的含量.8.2 由于在技術(shù)上和操作上可能出現(xiàn)的失誤，同時也由于標本中存在的干擾物質(zhì)，檢測結(jié)果可能有錯誤。對可疑結(jié)果應作相應的進一步檢測.8.生物安全防護8。1在檢測前，所有標本均應視為“陽性”標本即生物危險品。8。2如操作中不慎灑落血液，要及時對污染臺面消毒處理.8.3 操作前一定要做好自身防護（穿白大衣、帶口罩、白帽、膠皮手套）.8。4HBV對低溫、干燥、紫外線、70%乙醇均有耐受性。煮沸100c10分鐘、高壓蒸汽滅菌121c15分鐘或加熱160c2小時均可滅活HBV510g/L次氯酸鈉30分鐘,1:4000福爾馬林37c72小時，0。

9、5%過氧乙酸15分鐘均可破壞其傳染性.9。臨床意義9。1HBsAg陽性：血清HBsAg陽性，表示受檢者處于HBV的感染狀態(tài)。HBsAg也可從許多乙肝檢驗對象體液和分泌物中測出，如唾液、精液、乳汁、陰道分泌物等。9.2HBsAb陽性：多見于乙型肝炎處于恢復期或既往曾感染過HBV,現(xiàn)在已恢復，而且對HBV有一定的免疫力；同時,HBsAb陽性是對接種乙肝疫苗后產(chǎn)生效果，即接種免疫成功的指標。9.3HBeAg陽性：見于HBV感染的早期，表示血液中含有較多的病毒顆粒，提示肝細胞有進行性損害和高度傳染性；乙型肝炎加重之前，HBeAg即有升高，有助于預測肝炎病情，HBeAg持續(xù)陽性，易轉(zhuǎn)為慢性乙型肝炎；HB

10、eAg和HBsAgt勻為陽性的孕婦，可以將乙型肝炎傳播病毒給新生兒，其感染的陽性率為70%90%.9。4HBeAb陽性：多見于HBeAg轉(zhuǎn)陰的檢驗對象，意味著HBV部分被清除或抑制，病毒復制減少，傳染性降低；部分慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌檢驗對象可檢出HBeAb;在HBsAg和HBsAb陰性時，如能檢出HBeAh和HBcAb,也能確診為乙型肝炎近期感染。9.5HBcAb陽性:說明既往感染過乙肝病毒。它是感染病毒后最早呈陽性，也是最晚轉(zhuǎn)陰性的一項，而且有些人一輩子都是陽性。附：HBcAb-lgG陽性：高滴度表示正在感染HBV,低滴度則是既往感染過HBV的指標，具有流行病學的意義。HBcAb-IgM陽性：抗一HBcI