《放射免疫分析質(zhì)控》課件

放射免疫分析的

質(zhì)控與臨床應(yīng)用河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院黃建敏1精選ppt1960年美國學(xué)者Yalow和Berson創(chuàng)立了放射免疫分析,并因此在1977年獲得了諾貝爾醫(yī)學(xué)獎!2精選ppt相關(guān)管理規(guī)則自70年代起,放免技術(shù)廣泛應(yīng)用為了規(guī)范放射免疫分析試劑盒的生產(chǎn)和銷售,我國在1989年4月頒布了<<放射性藥品管理辦法>>,1995年12衛(wèi)生部藥政局頒布了<<放射免疫分析藥盒通則>>3精選ppt同時為了使放射免疫分析的結(jié)果更為準(zhǔn)確、操作行為更加規(guī)范，各地也出臺了相應(yīng)的質(zhì)控手冊等4精選ppt5精選ppt浙江省核醫(yī)學(xué)中心：

1993年2月浙江省核醫(yī)學(xué)中心成立，負(fù)責(zé)全省核醫(yī)學(xué)技術(shù)指導(dǎo)、培訓(xùn)核醫(yī)學(xué)從業(yè)人員（核醫(yī)學(xué)上崗培訓(xùn)及在崗培訓(xùn)）及全省核醫(yī)學(xué)質(zhì)量控制、管理等工作。

6精選ppt主要內(nèi)容誤差的種類產(chǎn)生誤差的主要原因和控制方法內(nèi)部質(zhì)量評價外部質(zhì)量評價放射免疫分析的臨床應(yīng)用7精選ppt

誤差系統(tǒng)誤差隨機(jī)誤差可以避免不可避免可以控制8精選ppt

用于評價系統(tǒng)誤差的指標(biāo)稱為偏倚（bias），而在體外放射分析中更多的使用準(zhǔn)確度（accuracy），是指：測定值與真值的一致程度

評價隨機(jī)誤差的指標(biāo)稱為精密度(precision),指在一定條件下，由一種實(shí)驗(yàn)方法對某一樣品多次重復(fù)檢測時所得結(jié)果的一致性9精選ppt10精選ppt產(chǎn)生誤差的主要原因誤差A(yù)DGEB玻璃容器加樣器具儀器和設(shè)備解釋及評價生物樣品的制備

操作

CF試劑

數(shù)據(jù)處理11精選ppt1.儀器和設(shè)備對誤差的影響

放射性探測儀離心機(jī)混勻器12精選ppt關(guān)于放射性探測儀應(yīng)注意一下幾點(diǎn)儀器是否在最佳公作條件下工作，例：用測131I的條件測125I就不妥測量的誤差：樣品的放射性活度過低，則使誤差增大；本底同樣對測量結(jié)果產(chǎn)生影響生物樣品也是引進(jìn)誤差的常見原因：例：對于能量較低的125I來說，管壁的自吸收現(xiàn)象13精選ppt離心機(jī)的使用一般的離心機(jī)只通過轉(zhuǎn)速來表示工作狀態(tài)，而忽略了半徑對離心力的影響，因此建議將每分鐘轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)換為相對離心力，其公式為：RCF=0.00001118×R×N2溫度同樣會對離心產(chǎn)生影響一般控制在40C為宜14精選ppt混勻器使用混勻器的目的是使參加反應(yīng)的試劑能夠充分的混勻，應(yīng)加注意的是防止將溶液濺出管外造成損失，引起誤差15精選ppt質(zhì)量控制樣品：實(shí)際工作中只利用標(biāo)準(zhǔn)曲線而不用質(zhì)量控制樣品的現(xiàn)象并不少見，這樣會使樣品測定值發(fā)生變化而難以覺察其它試劑：例如體外分析常用雙蒸餾水或去離子水及緩沖液，其質(zhì)量是否合格？16精選ppt2.玻璃容器及加樣器具對誤差的影響由于體外放射分析是微量操作技術(shù)，所以所使用的移液槍除應(yīng)校準(zhǔn)其容量外，還應(yīng)觀察其氣密程度；而操作中更應(yīng)注意其正確的排液方式及是否存在氣泡的影響17精選ppt3.試劑對誤差的影響標(biāo)準(zhǔn)品：不同的試劑盒對標(biāo)準(zhǔn)品的組裝方案不同，應(yīng)認(rèn)真區(qū)分并盡量取樣準(zhǔn)確，例，類固醇激素只能用選定的稀釋液來稀釋標(biāo)記物：隨時間延長，應(yīng)考慮到放射元素的脫標(biāo)和物理衰變的影響，而放射性濃度較高則可能因“衰變損傷”導(dǎo)致配體分子免疫活性下降18精選ppt結(jié)合劑：保存不當(dāng)是使結(jié)合劑質(zhì)量下降的主要原因，因此“不能反復(fù)凍融；一旦稀釋，一次性使用”分離劑：足量以供在一定時期內(nèi)連續(xù)使用，如需更換，必須鑒定，因即使是同一廠家同一批次其性能也可有所差別19精選ppt4.生物樣品的采集與制備生物樣品的采集應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：

體位：例：對血漿腎素活性測定的影響飲食：例：對基礎(chǔ)胰島素水平的影響

時間：例：晝夜對對皮質(zhì)醇和ACTH的影響機(jī)體狀態(tài)：例：應(yīng)激對皮質(zhì)醇和ACTH的影響

性別.年齡.月經(jīng)周期：例：對性激素水平的影響藥物：例：氫氯塞嗪對血清醛固酮的影響20精選ppt生物樣品的制備:

目的:適于檢測方法的需要而同時保存分析物在在生物樣品中的本來面目而不出現(xiàn)可以影響檢測結(jié)果的任何變化例如：是否需要抗凝？用何種抗凝劑？不能馬上檢測是否需要離心？保存的溫度如何？避免溶血！等等！！21精選ppt5.操作操作技術(shù)不熟練是產(chǎn)生隨機(jī)誤差的主要原因，其中加樣環(huán)節(jié)尤其重要!加樣速度是否均一，移液槍的使用是否規(guī)范？所用容器等是否清潔或受到污染？離心的時間、速度、分離劑的量、離心后至分離上清液的時間、吸取上清液的技巧等等

22精選ppt6.數(shù)據(jù)處理關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合方式的選擇:雖然其目的是最佳反映出劑量和效應(yīng)的關(guān)系，但目前沒有任何一種擬合方式能最佳的滿足所有的檢測系統(tǒng)，因此，需要去選擇！23精選pptLogitY=a+b·logX優(yōu)點(diǎn)：常用、計算簡單、使用方便缺點(diǎn)：有一定的偏離，特別是線性兩端3/2次方曲線回歸或logitY=a+b·logX+c（logX）2+d（logX）3優(yōu)點(diǎn)：真實(shí)性強(qiáng)缺點(diǎn)：計算復(fù)雜，不易發(fā)現(xiàn)并舍棄壞點(diǎn)WHO推薦四參數(shù)logistic法其適應(yīng)性強(qiáng)，但計算復(fù)雜24精選ppt但目前的放射免疫分析系統(tǒng)自帶的軟件能夠?qū)M合方式作出最佳的選擇！25精選ppt7.解釋和評價

單位的統(tǒng)一：最好使用國際制單位并統(tǒng)一起來正常值及正常范圍:各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該建立自己的正常值及正常范圍，借用文獻(xiàn)或以往的數(shù)據(jù)不可取，因?yàn)槌闃尤后w的差別和檢測技術(shù)的不同，都可能會影響到正常值及正常范圍。建立自己的正常值和正常范圍時也應(yīng)注意兩點(diǎn)：1受檢人群是否健康2受檢人群樣本含量大小26精選ppt內(nèi)部質(zhì)量控制主要是探討體外放射分析過程中對實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的控制，它包括從采集生物樣品到發(fā)出檢測報告的全過程，及時發(fā)現(xiàn)誤差，找出引起誤差的原因和改正的辦法，保證檢測的質(zhì)量，而對試劑盒的評價是十分重要的內(nèi)容27精選ppt評價試劑盒質(zhì)量的基本準(zhǔn)則：

精密度:指同一樣品在多次重復(fù)測定中所得結(jié)果的一致程度，反映隨機(jī)誤差。反應(yīng)精密度的指標(biāo)有變異系數(shù)/反應(yīng)誤差關(guān)系/精密度圖準(zhǔn)確度:指測定值與真值或標(biāo)示值在數(shù)量上的符合程度，反映系統(tǒng)誤差。常用回收率來表示特異性:指不受干擾物質(zhì)影響測定結(jié)果的程度，反映對分析物測定的專一性。通過交叉反應(yīng)率測定來表示28精選ppt靈敏度：指剛能與不含有標(biāo)準(zhǔn)配體的零標(biāo)準(zhǔn)管的測定結(jié)果在在統(tǒng)計學(xué)上區(qū)別開來的配體的最低濃度。一般采用最低可探測濃度來表示有效性：又稱健全性，指試劑盒能夠達(dá)到實(shí)驗(yàn)的某一具體目標(biāo)的有效程度，因此應(yīng)有其正常值和正常范圍，正常與異常之間有良好的界限。健全性實(shí)驗(yàn)對于評價檢測結(jié)果不可或缺29精選ppt穩(wěn)定性：指試劑盒在合理的保存條件下，在規(guī)定的時間內(nèi)能保持其全部原有性能不變的能力，常用的質(zhì)量指標(biāo)有零標(biāo)準(zhǔn)試管結(jié)合率（B0%）/非特異結(jié)合率（NSB%）/經(jīng)直線化后的標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距/斜率/及相關(guān)系數(shù)或者有效劑量濃度（ED75/ED50/ED25）/質(zhì)控樣品的質(zhì)控圖表等30精選ppt

但在日常的常規(guī)工作中，每測一批樣品要進(jìn)行如此眾多的質(zhì)量指標(biāo)的計算，實(shí)際上是難以做到的！為此，需要擬訂能夠在日常工作中完成的/又能反應(yīng)檢測質(zhì)量的方案，這種方案分為兩種類型：實(shí)驗(yàn)室批內(nèi)監(jiān)測和實(shí)驗(yàn)室批間監(jiān)測31精選ppt實(shí)驗(yàn)室批內(nèi)監(jiān)測方案推薦以下十項指標(biāo)：⑴零標(biāo)準(zhǔn)管結(jié)合率（B0%）⑵非特異性結(jié)合率（NSB%）⑶反應(yīng)誤差關(guān)系（RER）32精選ppt⑷當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)用雙對數(shù)轉(zhuǎn)換并經(jīng)線性回歸獲得方程Y=a+bX時，選用截距（a），斜率（b），相關(guān)系數(shù)（r）及有效劑量濃度值50（ED50）等四個指標(biāo)，以反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的質(zhì)量⑸應(yīng)用質(zhì)量控制樣品測得值求出標(biāo)準(zhǔn)差及偏差值；精密度圖在允許的變異系數(shù)限度下（如10%），所包括的標(biāo)準(zhǔn)劑量濃度點(diǎn)數(shù)33精選ppt實(shí)驗(yàn)室批間監(jiān)測方案批間監(jiān)測的基礎(chǔ)是每批檢測的質(zhì)量，著重是觀察檢測的穩(wěn)定性，并從相關(guān)指標(biāo)的分析中，及時發(fā)現(xiàn)發(fā)生誤差的原因，并提供消除的方法，以保證檢測的質(zhì)量。進(jìn)行批間監(jiān)測的主要形式是制備各種質(zhì)量控制圖或表，以了解其穩(wěn)定性及變化趨勢34精選ppt

工作中還應(yīng)注意以下幾點(diǎn):

對于檢測結(jié)果應(yīng)密切結(jié)合臨床,必要時積極與臨床科室聯(lián)系,指導(dǎo)其正確采集及送檢各種標(biāo)本不任意更換試劑盒測定結(jié)果必須由有經(jīng)驗(yàn)的主治醫(yī)師或主管技師復(fù)核后簽發(fā)多項指標(biāo)聯(lián)合測定時,如有矛盾者應(yīng)及時復(fù)查后發(fā)報告對異常結(jié)果及特殊病例要及時與臨床醫(yī)生溝通一二三四35精選ppt實(shí)驗(yàn)室外質(zhì)量控制

即室間質(zhì)控:對各實(shí)驗(yàn)室之間測定結(jié)果按統(tǒng)一評價方案及方法比較分析,必須建立在嚴(yán)格的內(nèi)部質(zhì)量控制的基礎(chǔ)上組織單位:各省臨床檢驗(yàn)中心,衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心36精選ppt

我國于1982年部臨檢中心成立時開始在全國范圍內(nèi)開展臨床檢驗(yàn)室間質(zhì)量評價活動衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2006]73號衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)<<醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法>>的通知和衛(wèi)醫(yī)發(fā)［２００５］１０４號衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)<<醫(yī)院管理評價指南（試行）>>的通知均要求臨床實(shí)驗(yàn)室參加室間質(zhì)量評價活動

室間質(zhì)量評價是臨床實(shí)驗(yàn)室全面質(zhì)量管理的重要組成部分,也是醫(yī)院管理年督導(dǎo)的重要內(nèi)容之一37精選ppt

室間質(zhì)量評價可用于確定某個實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測或測量的能力,以及監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室的持續(xù)能力識別實(shí)驗(yàn)室中的問題并制定相應(yīng)的補(bǔ)救措施確定新的檢測和測量方法的有效性和可比性,并對這些方法進(jìn)行相應(yīng)的監(jiān)控增加實(shí)驗(yàn)用戶的信心識別實(shí)驗(yàn)室間的差異38精選ppt39精選ppt放射免疫分析的臨床應(yīng)用

臨床常用近200種腫瘤相關(guān)抗原的測定：AFP、CEA、CA199、CA-125、CA153、CA724、CYFRA211、PSA等激素的測定：下丘腦-垂體-甲狀腺軸激素，下丘腦-垂體-性腺軸激素，下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸激素，胃腸道激素，心血管激素，甲狀旁腺素與降鈣素，生長激素等非激素蛋白質(zhì)的測定：鐵蛋白、各