山東省樂陵市高中生物微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課件.ppt

1、1微生物與人類密切相關(guān)。雖然有些微生物能使動物和植物生病，但大多數(shù)微生物對人類有益。請回答以下問題。(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方一般含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。當(dāng)分解尿素的細(xì)菌從土壤中分離出來時， 添加到培養(yǎng)基中的唯一氮源是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (2)在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒置平板操作中，為什么平板在濃縮后要倒置？ _ _ _

2、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ .(3)接種微生物的方法有很多，其中最常用的方法是平板劃線法和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。當(dāng)用平板劃線法接種時，為什么接種杯要在操作的第一步和每次劃線前燒？_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

3、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(4)在劃線操作結(jié)束時，您是否還需要燒掉接種環(huán)？為什么？_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ .從土壤中分離尿素分解細(xì)菌需要選擇性培養(yǎng)基，并且唯一的氮源是尿素。在接種過程中，最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。第一次焚燒接種環(huán)的目的是殺死接種環(huán)上的微生物，防止其他微生物污染培養(yǎng)基。在每次劃線之前燃燒接種環(huán)的目的是殺死最后一次接種期間留下的菌株，從

4、而接種環(huán)上的菌株直接來自下一次劃線中的最后一次劃線的末端，從而在多次劃線之后可以獲得單個菌落。最后一步是焚燒接種環(huán)進(jìn)行滅菌，以避免因菌株引起的環(huán)境污染和操作人員感染。答：(1)尿素選擇(2)水滴會凝結(jié)在培養(yǎng)皿的蓋子上，防止水滴落入培養(yǎng)皿造成污染，并使培養(yǎng)基表面的水蒸發(fā)得更好(3)稀釋涂布板對接種環(huán)的第一次灼燒是為了防止接種環(huán)上的其他微生物污染培養(yǎng)基。在每次劃線前燒接種環(huán)的目的是殺死最后一次接種時留下的菌株，使接種環(huán)上的菌株直接來自下一次劃線中最后一次劃線的末端，從而在多次劃線后獲得單個菌落。(4)需避免環(huán)境污染和細(xì)菌引起的感染，2(安徽高考，2009)以下是對“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實驗操作的描

5、述，其中的誤差是：(1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是用蒸餾水配制的，經(jīng)高溫高壓滅菌后，從平板B中取出0.1毫升104、105、106倍的土壤稀釋液和0.1毫升無菌水，分別涂在每個平板上。將實驗組和對照組的平板倒置，在37恒溫培養(yǎng)2448小時。在確定對照組的無菌性后，選擇具有超過300個菌落的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)。分析：在確定對照組的無菌性后，選擇具有30300個菌落的平板進(jìn)行計數(shù)。d是錯的；甲是培養(yǎng)基的滅菌方法，乙建立了一系列的對照實驗，丙是細(xì)菌的培養(yǎng)方法，這些都是正確的做法。回答：D，1篩選原則，2實驗流程，特別提醒，為了確定纖維素分解菌，需要進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)纖維素酶的實驗。纖維素酶的發(fā)酵方法有兩種：液體

6、發(fā)酵和固體發(fā)酵。纖維素酶的測定方法一般是定量測定濾紙等纖維素被纖維素酶分解后產(chǎn)生的葡萄糖。在該過程中是否需要“選擇性培養(yǎng)”應(yīng)根據(jù)樣品中目標(biāo)菌株的數(shù)量來確定。3、分離土壤中纖維素分解菌的方法有：(1)稀釋倒置平板法、包被平板法、單細(xì)胞挑取法、選擇性培養(yǎng)和分離抗體C-D，分析：分離土壤中的纖維素分解菌，先培養(yǎng)，再梯度稀釋，包被平板培養(yǎng)和單細(xì)胞挑取獲得純培養(yǎng)物。稀釋涂布平板法是將融化的培養(yǎng)基倒入無菌培養(yǎng)皿中制成無菌平板。冷卻固化后，在整個平板表面涂上一定量的一定稀釋度的細(xì)菌懸液，培養(yǎng)后形成單個菌落。答：B，(1)從近年來的生物試題來看，“微生物的培養(yǎng)與利用”測試中心無疑是近年來一中選修課最大的熱點(diǎn)，

7、如2010年山東卷T34、2009年寧夏卷T40、2009年安徽卷T9、2008年山東卷T34(2)(4)、廣東卷T38等。2008年山東卷T34(3)、2007年山東卷T34(3)和寧夏卷T32(3)(5)對選擇培養(yǎng)基的效果進(jìn)行了檢驗。(2)微生物的分離、純化和培養(yǎng)過程是微生物工程應(yīng)用的基礎(chǔ)，是近年來新課程標(biāo)準(zhǔn)高考的重要考試中心和熱點(diǎn)，有望參與2012年高考?，F(xiàn)在大力提倡無紙化辦公，但每年不可避免地會產(chǎn)生大量的廢紙，其主要成分是木質(zhì)纖維，人類正試圖將其轉(zhuǎn)化為一種新的資源乙醇。圖為工業(yè)上利用微生物從纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程。請回答相關(guān)問題：(1)自然界所需的大多數(shù)微生物都分布在_ _ _

8、_ _ _的環(huán)境中。從土壤中獲得的微生物在以_ _ _ _ _ _ _ _ _為碳源和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的培養(yǎng)基上培養(yǎng)_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (2)在上述篩選過程中獲得了三個菌落，它們被分別培養(yǎng)并完成了連接，并且在三種相同的酶溶液中的酶濃度是相同的，所以你認(rèn)為三種酶溶液的活性(必須是相同的，不同的， (3)根據(jù)測定結(jié)果，該環(huán)節(jié)常選用木霉菌，因此該環(huán)節(jié)獲得的酶為_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

9、 _ _ _ _ _ _ _ _ _。 (4)_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (5)雖然該技術(shù)前景廣闊，但也存在酶成本高等問題。 為了降低成本，_ _ _ _ _ _ _和其他技術(shù)可用于使酶可重復(fù)使用。(1)富含纖維素的土壤含有大量以纖維素為碳源的纖維素分解菌

10、。剛果紅可以在培養(yǎng)基中與纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素分解時，不能形成復(fù)合物，并且在培養(yǎng)基中將出現(xiàn)以纖維素分解細(xì)菌為中心的透明圈。該方法用于篩選纖維素分解菌。(2)在酶溶液中蛋白質(zhì)濃度相同的情況下，酶活性不一定相同。酶活性是否相同可以通過纖維素分解后產(chǎn)生的葡萄糖量是否相等來確定。(3)木霉能產(chǎn)生纖維素酶并分解纖維素。(4)酵母是酒精發(fā)酵中常用的菌種，因此在接種過程中要避免雜菌的污染。乙醇是酵母厭氧發(fā)酵的產(chǎn)物，發(fā)酵過程中必須保持厭氧環(huán)境。(5)固定化酶技術(shù)可以重復(fù)使用，降低酶的成本。答案(1)剛果紅透明圈富含纖維素(其他答案都是合理的，比如更多的落葉等。)(2)不一定相同的葡萄糖在纖維素被纖維素

11、酶分解后產(chǎn)生(3)纖維素(4)酵母發(fā)酵裝置的緊密性(或保證厭氧條件等)(5)固定化酶，1(2010年重慶高考)炭疽是由炭疽桿菌引起的人畜共患傳染病。炭疽桿菌的兩端被截斷并排列在竹節(jié)中，菌落呈卷曲狀。根據(jù)噬菌體的宿主特異性，通過實驗可以診斷疑似炭疽患者。(1)細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。(2)細(xì)菌鑒定：實驗流程如圖所示：配制好的液體培養(yǎng)基應(yīng)經(jīng)_ _ _ _ _ _ _ _ _滅菌；實驗中使用的液體培養(yǎng)基的碳源是_ _ _ _ _ _ _ _(填充有“無機(jī)碳對照組應(yīng)加_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

12、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

13、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

14、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

15、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _排除的疑似患者和易感人群可接種炭疽桿菌疫苗，以刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。除了T細(xì)胞和B細(xì)胞外，還有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。分析：培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌。炭疽桿菌的同化類型為異養(yǎng)型，因此應(yīng)選擇有機(jī)碳作為其碳源。微生物很小，不能用肉眼觀察，所以只能借助顯微鏡觀察細(xì)菌的特性。在液體培養(yǎng)基中，細(xì)菌的增殖會導(dǎo)致培養(yǎng)液的渾濁

16、；在本實驗中，實驗變量是是否添加噬菌體，因此對照組的處理應(yīng)與實驗組一致，只是不添加噬菌體(即應(yīng)添加不含噬菌體的生理鹽水)。噬菌體可以破壞細(xì)菌細(xì)胞，從而使培養(yǎng)液變得清澈。在特異性免疫的誘導(dǎo)階段，吞噬細(xì)胞參與抗原呈遞，漿細(xì)胞是直接產(chǎn)生抗體的細(xì)胞。答案是：(2)高壓蒸汽(100千帕蒸汽)有機(jī)碳顯微鏡細(xì)菌用等量的生理鹽水繁殖吞噬細(xì)胞和漿細(xì)胞；(2)2009年寧夏高考(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除了繁殖條件外，還應(yīng)考慮_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _和滲透壓的條件。由于其體積小、結(jié)構(gòu)簡單、突變類型容易選擇等特點(diǎn)。它經(jīng)常被用作遺傳研究的實驗材料。(2)在微生物

17、培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，培養(yǎng)基和培養(yǎng)容器應(yīng)進(jìn)行消毒滅菌。操作員的手需要清潔和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _；靜止空氣中的細(xì)菌可以被紫外線殺死，因為紫外線可以使蛋白質(zhì)和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _變性。(3)如果用稀釋涂布平板法計數(shù)活大腸桿菌數(shù)，為了使估計值更接近實際值，除了嚴(yán)格操作和多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品的稀釋度。(4)一般來說， 所獲得的純菌株也可以初步_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

18、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (5)培養(yǎng)大腸桿菌時，必須在接種前檢查培養(yǎng)基是否被污染。 對于固體培養(yǎng)基， 檢測方法應(yīng)是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (6)如果用大腸桿菌進(jìn)行實驗， 用過的培養(yǎng)基和培養(yǎng)物必須用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _