X8月季的花藥培養(yǎng)講解課件

1、X8月季的花藥培養(yǎng)講解專題三專題三 植物植物(zhw)的組織培養(yǎng)技術(shù)的組織培養(yǎng)技術(shù)課題課題(kt)(kt)2 2 月季的花藥培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)第一頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解秋水仙秋水仙素處理素處理(chl)(chl)花藥花藥(huyo)(huyo)離離體培養(yǎng)體培養(yǎng)單倍體育種單倍體育種(y zhng)(y zhng)AABBaabbPAaBbF1AAbbABAbaBab單倍體單倍體植株植株AABBAAbbaaBBaabb原理：原理：細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性植株矮小，高度不育植株矮小，高度不育第二頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解月季月季(yuj)(yuj)( (Rosa chin

2、ensis Jacq.) )玫瑰玫瑰(mi gui)(mi gui)(Rosa rugosa Thunb.)一年多生，花朵較大，花莖一年多生，花朵較大，花莖光滑、莖上刺少而粗，香味光滑、莖上刺少而粗，香味(xin wi)(xin wi)寡淡，果實(shí)圓形。寡淡，果實(shí)圓形。一年一生，花朵較小，花莖一年一生，花朵較小，花莖有剛毛、莖上刺多而小，香有剛毛、莖上刺多而小，香味濃郁，果實(shí)扁圓形。味濃郁，果實(shí)扁圓形。第三頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解被子植物：被子植物：種子種子有果皮和種皮有果皮和種皮包被包被(bo bi)(bo bi)的植物的植物。被子植物被子植物(biz-zhw)(biz-zhw)

3、和裸子和裸子植物植物裸子植物：裸子植物：種子種子沒有果皮沒有果皮，但有但有種皮種皮包被包被(bo bi)(bo bi)的植物。的植物。實(shí)例：向日葵、梨、月季等實(shí)例：向日葵、梨、月季等開花并結(jié)果的植物開花并結(jié)果的植物。實(shí)例：松、杉、柏實(shí)例：松、杉、柏等。等。第四頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解花的結(jié)構(gòu)(jigu)第五頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解花絲：花絲：輸送輸送(sh sn)(sh sn)營(yíng)營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)花藥：花藥：囊狀結(jié)構(gòu)囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉，內(nèi)有很多花粉(hufn)( (細(xì)胞細(xì)胞）2 2、花粉母細(xì)胞、花粉母細(xì)胞(小孢子小孢子(boz)(boz)母細(xì)胞母細(xì)胞) 花粉花粉( (未成熟

4、未成熟) ) 即：即：?jiǎn)伪扼w的生殖細(xì)胞單倍體的生殖細(xì)胞3 3、發(fā)育階段：、發(fā)育階段：四分體時(shí)期、單核期、雙核期四分體時(shí)期、單核期、雙核期（一）被子植物的花粉發(fā)育（一）被子植物的花粉發(fā)育1 1、雄蕊、雄蕊基礎(chǔ)知識(shí)基礎(chǔ)知識(shí)減數(shù)分裂減數(shù)分裂第六頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解花粉管細(xì)胞核花粉管細(xì)胞核生殖生殖細(xì)胞細(xì)胞核核花粉發(fā)育花粉發(fā)育(fy)(fy)過程過程圖圖小孢子小孢子(boz)(boz)母細(xì)胞母細(xì)胞花粉母花粉母細(xì)胞細(xì)胞4 4個(gè)小孢個(gè)小孢子子(boz)(boz)減減數(shù)數(shù)分分裂裂 小孢子小孢子四分體四分體時(shí)時(shí)期期單核居中期單核居中期單核靠邊期單核靠邊期雙核期雙核期有絲分裂有絲分裂2 2個(gè)精子

5、個(gè)精子有絲分裂有絲分裂營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞單核期單核期生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞第七頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解1 1花粉花粉(hufn)(hufn)母細(xì)胞母細(xì)胞（2n2n）4 4個(gè)小孢子個(gè)小孢子(boz)(boz)( (小孢子四分小孢子四分體體) )（n n）減分減分有分有分1 1個(gè)花粉管細(xì)胞核個(gè)花粉管細(xì)胞核（n n）1 1個(gè)生殖細(xì)胞核個(gè)生殖細(xì)胞核（n n）有分有分2 2個(gè)精子個(gè)精子(jngz)(jngz)單核居中期單核居中期（n n）單核靠邊期單核靠邊期（n n）即即4 4個(gè)單倍體細(xì)胞個(gè)單倍體細(xì)胞雙雙核核期期單核期單核期基因型相同基因型相同第八頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解雌蕊雌蕊(c

6、ru)(cru)的結(jié)的結(jié)構(gòu)構(gòu)第九頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解（二）產(chǎn)生（二）產(chǎn)生(chnshng)(chnshng)花粉植株花粉植株( (單倍體植株單倍體植株) )的兩種途徑的兩種途徑花粉花粉花粉花粉胚狀體胚狀體愈傷組織愈傷組織叢芽叢芽生根生根移栽移栽脫分化脫分化分化分化再分化再分化誘導(dǎo)誘導(dǎo)脫分化脫分化說明：說明：兩種途徑之間并沒有絕對(duì)的界限，主要取決于培兩種途徑之間并沒有絕對(duì)的界限，主要取決于培養(yǎng)基中養(yǎng)基中激素的種類及其濃度激素的種類及其濃度(nngd)(nngd)的配比的配比。基礎(chǔ)知識(shí)基礎(chǔ)知識(shí)第十頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解花粉花粉花粉花粉胚狀體胚狀體愈傷組織愈傷組織叢

7、芽叢芽生根生根移栽移栽脫分化脫分化分化分化再分化再分化誘導(dǎo)誘導(dǎo)脫分化脫分化基礎(chǔ)知識(shí)基礎(chǔ)知識(shí)胚狀體胚狀體( (體細(xì)胞胚或花粉胚）體細(xì)胞胚或花粉胚）組織培養(yǎng)過程中，某些組織培養(yǎng)過程中，某些離體的體細(xì)胞或花粉細(xì)胞離體的體細(xì)胞或花粉細(xì)胞轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)變成的變成的與與胚非常相似的結(jié)構(gòu)胚非常相似的結(jié)構(gòu)。( (也具有胚芽也具有胚芽(piy)(piy)、胚根、胚軸等結(jié)構(gòu)）、胚根、胚軸等結(jié)構(gòu)）胚狀體的發(fā)育過程和正常胚類似。胚狀體的發(fā)育過程和正常胚類似。（二）產(chǎn)生花粉植株（二）產(chǎn)生花粉植株(zhzh)(zhzh)( (單倍體植株單倍體植株) )的兩種途徑的兩種途徑第十一頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解（三）影響花藥培

8、養(yǎng)的因素（三）影響花藥培養(yǎng)的因素(yn s)(yn s) 1 1、材料的選擇、材料的選擇 此外，此外，親本親本生長(zhǎng)條件生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理材料低溫預(yù)處理、接種密度接種密度等等 2 2、培養(yǎng)基的組成、培養(yǎng)基的組成 從從花藥花藥所處時(shí)期看：所處時(shí)期看： 從從花粉花粉(hufn)(hufn)發(fā)育時(shí)期看發(fā)育時(shí)期看： 從從花蕾花蕾開放程度看：開放程度看：初花期初花期( (花期早期花期早期(zoq)(zoq) )的花藥的花藥單核期單核期( (單核靠邊期單核靠邊期) )的花粉的花粉完全未開放的花蕾完全未開放的花蕾第十二頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解為什么花瓣為什么花瓣(hubn)(hubn)松動(dòng)

9、會(huì)給材料的消毒帶來松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來困難？困難？為什么為什么選擇完全未開放的花蕾選擇完全未開放的花蕾(huli)(huli)作花作花藥離體培養(yǎng)的材料藥離體培養(yǎng)的材料？花瓣松動(dòng)，微生物可能侵入到花藥花瓣松動(dòng)，微生物可能侵入到花藥，給消毒，給消毒(xio d)(xio d)帶來困難。帶來困難。2 2、含菌少、易消毒、含菌少、易消毒1 1、可挑選到單核期的花藥、可挑選到單核期的花藥第十三頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解實(shí)驗(yàn)(shyn)操作1 1、材料、材料(cilio)(cilio)的的選取選取2 2、材料、材料(cilio)(cilio)的消的消毒毒3 3、接種和培養(yǎng)、接種和培養(yǎng)4 4、

10、鑒定和篩選鑒定和篩選第十四頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解1 1、材料、材料(cilio)(cilio)選選取取通過通過鏡檢鏡檢確定確定花粉是否處于適宜的發(fā)育期：花粉是否處于適宜的發(fā)育期： 最常用的方法最常用的方法：醋酸洋紅法醋酸洋紅法( (將細(xì)胞核染成紅色）將細(xì)胞核染成紅色） 某些植物的花粉某些植物的花粉細(xì)胞核不易細(xì)胞核不易(b y)(b y)著色著色：焙花青焙花青- -鉻礬法鉻礬法， 將花粉細(xì)胞核染成將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色藍(lán)黑色。 從花藥的時(shí)期從花藥的時(shí)期(shq)看看： 從花粉發(fā)育期看：從花粉發(fā)育期看： 從花蕾開程度看：從花蕾開程度看：選擇適宜的月季花藥選擇適宜的月季花藥初花期的花

11、藥初花期的花藥單核期的花粉單核期的花粉完全未開放的花蕾完全未開放的花蕾第十五頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解2 2、材料、材料(cilio)(cilio)的消的消毒毒花花蕾蕾（7070酒精酒精(jijng)(jijng)）約約30s30s（無(wú)菌水（無(wú)菌水）清洗清洗(qngx)(qngx)（無(wú)菌吸水紙）（無(wú)菌吸水紙） 吸干水分吸干水分（0.10.1氯化氯化汞溶液汞溶液）（無(wú)菌水（無(wú)菌水）沖洗沖洗提示：提示： 用于培養(yǎng)花藥的花蕾，用于培養(yǎng)花藥的花蕾，外面有花萼、花瓣保護(hù)，通外面有花萼、花瓣保護(hù)，通常處于無(wú)菌狀態(tài)常處于無(wú)菌狀態(tài)，所以只需將整個(gè)花蕾消毒即可。，所以只需將整個(gè)花蕾消毒即可。思考：思

12、考：月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比，二者月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比，二者有何不同？有何不同？ 在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗。洗滌和軟刷刷洗。 第十六頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解在在無(wú)菌條件下無(wú)菌條件下除去除去花蕾花蕾(huli)(huli)的萼片和花瓣，取出花藥的萼片和花瓣，取出花藥b b、要徹底去除、要徹底去除(q ch)(q ch)花絲花絲取出花藥后取出花藥后立即立即(lj)(lj)接種于培養(yǎng)基上，每瓶接種花藥接種于培養(yǎng)基上，每瓶接種花藥7-7-1010個(gè)。個(gè)。剝?nèi)』ㄋ巹內(nèi)』ㄋ巃 a、盡

13、量不損傷花藥、盡量不損傷花藥接種接種注意：注意：3 3、接種和培養(yǎng)、接種和培養(yǎng)溫度控制在溫度控制在2525左右左右，不需要光照。，不需要光照。幼小植株形成后幼小植株形成后才需要光照才需要光照。 培養(yǎng)培養(yǎng)第十七頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解培養(yǎng)培養(yǎng)20-3020-30天天后，花藥后，花藥(huyo)(huyo)分裂形成分裂形成愈傷組織或胚狀體愈傷組織或胚狀體l若形成胚狀體若形成胚狀體：一個(gè)花藥會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株：一個(gè)花藥會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株(zhzh)(zhzh)，必須盡快將幼小植株分開，必須盡快將幼小植株分開，分別移植到新的培養(yǎng)基上分別移植到新的培養(yǎng)基上。l 若形成愈傷組織若形成愈傷組織

14、：應(yīng)及時(shí)：應(yīng)及時(shí)(jsh)(jsh)將愈傷組織將愈傷組織轉(zhuǎn)移到分化轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)基上，以便進(jìn)一步分化出再生植株，以便進(jìn)一步分化出再生植株第十八頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解在花藥培養(yǎng)中，特別是通過在花藥培養(yǎng)中，特別是通過愈傷組織愈傷組織形成的花粉形成的花粉植株植株(zhzh)(zhzh)，染色體，染色體組的數(shù)目常常會(huì)發(fā)生改變。組的數(shù)目常常會(huì)發(fā)生改變。（主主要原因是營(yíng)養(yǎng)核和生殖核融合造成的要原因是營(yíng)養(yǎng)核和生殖核融合造成的）4 4、鑒定、鑒定(jindng)(jindng)和篩和篩選選第十九頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解菊花菊花(jhu)(jhu)組織培養(yǎng)與月季花藥離體培養(yǎng)

15、的比較組織培養(yǎng)與月季花藥離體培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目菊花組織培養(yǎng)菊花組織培養(yǎng)月季花藥離體培養(yǎng)月季花藥離體培養(yǎng)原理原理植物激素植物激素染色體倍染色體倍性的鑒定性的鑒定材料材料培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果 細(xì)胞細(xì)胞(xbo)(xbo)的全能性的全能性體細(xì)胞體細(xì)胞花藥花藥(huyo)(huyo)( (花粉花粉）正常植株正常植株單倍體植株單倍體植株不必添加不必添加需要添加需要添加不需要不需要需要需要第二十頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解Thanks!第二十一頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8月季的花藥培養(yǎng)講解提示：提示：二核花粉粒二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管細(xì)胞核和生：成熟的花粉粒中，只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。（殖細(xì)胞核。（精子在花粉管中形成精子在花粉管中形成）三核花粉粒三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞再：有些植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞再進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，這樣的花粉在成熟進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，這樣的花粉在成熟時(shí)，含有時(shí)，含有(hn yu)一個(gè)營(yíng)養(yǎng)核和兩個(gè)精子。一個(gè)營(yíng)養(yǎng)核和兩個(gè)精子。第二十二頁(yè)，共二十三頁(yè)。X8