抗生素生產(chǎn)工藝

1、抗生素生產(chǎn)的工藝過程,菌種 孢子制備 種子制備 發(fā)酵 發(fā)酵液預處理 提取及精制 成品包裝,缽面連買跟至胯衛(wèi)阻獸乙聰弧糖農(nóng)兩搗灌乍賤航稚掀簍梅塊九烈?guī)|昆將抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,菌 種,來源于自然界，獲得能產(chǎn)生抗生素的微生物，經(jīng)分離、選育和純化后即稱為菌種 菌種的保藏：冷凍干燥、超低溫冷凍、砂土管、液體石蠟、斜面低溫保藏,呸腐末麗免恐漆條棲曰剔晝秀跳潤糯竹迎方魄煙晦膀趾輝與鄲框趟眷就慧抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,孢子制備,將保藏的處于休眠狀態(tài)的孢子，接種至固體斜面培養(yǎng)基，在一定溫度下培養(yǎng)5-7或7日以上 進一步用扁瓶在固體培養(yǎng)基上擴大培養(yǎng),侗茹現(xiàn)坦殘糧炯矽退掃足臭攏伶甄泵哆妙構(gòu)緬眼謄券

2、們糖饞訓惹沖硅迭伎抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,種子制備,目的使孢子發(fā)芽、繁殖以獲得足夠數(shù)量的菌絲，并接種到發(fā)酵罐中 搖瓶或直接將孢子接入種子罐逐級放大培養(yǎng) 種子培養(yǎng)定時取樣作無菌試驗，觀察菌絲形態(tài)，測定種子液中發(fā)酵單位和進行生化分析 種子級數(shù),摟層續(xù)宋遵鼓彼喚牛庇水披報桃頒球計對酬乳套猙址哭六公臻刪奴叔副霉抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,培養(yǎng)基的配制,碳源 氮源 無機鹽類 前體,寄曹哄告攔蝎綱詛帥缽夢趙務包大圃赤蓉瘋夸濤肅昭帶刁杯城晤卵胰透稍抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,碳 源,供給菌種生命活動所需能量，構(gòu)成菌體細胞及代謝產(chǎn)物 參與抗生素的生物合成 常用碳源：淀粉、葡萄糖及油脂,嘶耙啄腮寺浸瞎

3、雀艇遜咽玲噪締欲資耶綜淖皺憨伶查背在獸瑯朔芽炔蝴辨抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,氮 源,構(gòu)成菌體細胞物質(zhì)和含氮代謝物 參與含氮抗生素合成 有機氮源 無機氮源,倔締葫桶傳卒般拳矽突煥蔡伶巡驟陸測靜擅正已偶礫弓濤攬歌隴朽敢湊嘎抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,無機鹽和微量元素,同其他微生物,樞嘆繳鈉拌籬翔殘尼猛疆臣估鈞鍍醫(yī)疾涉鍋瀉祝繼潔功茹叭沖把惹猖燦冠抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,前 體,菌體利用其構(gòu)成抗生素分子中的一部分而其本身沒有顯著改變的物質(zhì) 一定條件下控制菌體合成抗生素的方向并增加抗生素的產(chǎn)量,熒綸淳鶴喲鎂洶種塵剿臼缸董碉翼桿香貧篙戰(zhàn)潦膨廣她攣隅鴿顧芋籠啡抬抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,發(fā)

4、酵,目的是使微生物大量分泌抗生素 接種10% 通氣 攪拌 控制罐溫 消泡 控制pH 定時采樣進行生化分析、鏡檢，測定菌體濃度、殘?zhí)橇?、抗生素含量?挨努變舅荊傍月剿廉磕蘊哈蘆嚼符擔屯掖分真凳堪轄樸毗扭崩滌嫌戍浚呵抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,發(fā)酵液的過濾和預處理,分離菌絲、去除雜質(zhì) 預處理：去除高價無機離子和蛋白質(zhì) 過濾：去除固形物及菌體,渣溉鉚后篙雇敞腐旗洗擴酌嬌擂軋驚符喉喘踩剔啞赤裸叫恐功組阻朝疼執(zhí)抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,發(fā)酵液的預處理,草酸及磷酸去除高價離子鈣、鎂，還能促使蛋白質(zhì)凝固 黃血鹽有利于去除鐵離子 硫酸鋅有利于凝固蛋白質(zhì) 等電點法、加熱法、絮凝法去除蛋白,劃滑信鄙蚊瞄鶴嫁

5、毅記入噎茲屑濱霜僳代坷御蔓序頻迫氖虎賈竅函得晴狂抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,發(fā)酵液的過濾,板框過濾機 鼓式真空過濾機 自動出渣離心機 傾析器,逝恥侶河心洲住畦優(yōu)獻柔汐臂朔芬鋸棄凡跌織鋒各薩暮橋貌豬過屈秋耍交抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,抗生素的提取,溶媒萃取法 離子交換法 直接沉淀法,案常心鰓凜莉皿錨辭身北頑檀前漿爐盔用嚴碌斡尉濫你孟禿坑桂牧假咸染抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,抗生素的精制,藥品生產(chǎn)符合GMP規(guī)定 脫色及去除熱原質(zhì) 結(jié)晶和重結(jié)晶,陡謎賺痕丈斃廊嬌挑孫砍務衰蟻厄兩帳動扎搪躬禁面哩座郁祥喳蜜淫鴻簍抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,脫 色,色素是發(fā)酵過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，與菌種及發(fā)酵條

6、件有關(guān) 活性炭脫色,足驅(qū)翰黎毒羌異菌乳陌仔寞挪駛疇澄矢宙端許片吞粉赤忽嘉夯程股倆漠四抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,熱原質(zhì),在生產(chǎn)過程中由于被污染后由雜菌所產(chǎn)生的一種內(nèi)毒素，G-產(chǎn)生的熱原反應高于G+，是多糖磷類脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的結(jié)合體，引起惡寒高熱，甚至休克 活性炭吸附 超濾去除,斧邵衍媳肘邱嘯囑楚北淪姑斷膩揍簧侶恭姿眼串惱爍什略耙聰咱雍鋁撣斗抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,進一步精制,結(jié)晶與重結(jié)晶 共沸蒸餾法 柱層析法 中間鹽轉(zhuǎn)移法 分子篩,臘浪絮在肚部尺瑣丫凰涕賤鱗蜂拔氓只兌殉駒繞俱磷諾欽捻箱跑閹安檀青抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,青霉素的生產(chǎn)工藝,菌種：產(chǎn)黃青霉素 （Pen chrysogen

7、um） 生產(chǎn)能力達到30000-60000/mL,裕眷寞廁珍丫磊捏滁鄧縱焊我似凡亞嗅锨告躺滅咬喲狗原存抄朔為秉眠媽抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,工藝流程,冷凍管 斜面母瓶 大米孢子 一級種子罐 二級種子罐 發(fā)酵罐 放罐 提煉,孢子培養(yǎng),25C,6-7d,孢子培養(yǎng),25C,6-7d,發(fā) 酵,25C,40-45d 1:2VVM,25C,40-45d 1:1.5VVM,種子培養(yǎng),種子培養(yǎng),22-26C,6-7d 1:1-0.8VVM,冷至15 C,由匿勛柿衡汁脅吭際婁暢竭籽澀隋疹揩匪誦漓描媚墩磷托摔菲穗答突糜捎抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,培養(yǎng)基,碳源：利用多種碳源和乳糖、蔗糖、葡萄糖等。普遍采用淀

8、粉經(jīng)酶水解的葡萄糖糖化液進行流加 氮源：可選用玉米漿、花生餅粉、精制棉籽餅粉或麩質(zhì)粉，并補加無機氮源 前體：為生物合成含有芐基基團的青霉素G，在發(fā)酵中加入前體如苯乙酸或苯乙酰胺，加入量不能大于0.1%，采用多次加入方式 無機鹽：硫、磷、鈣、鎂、鉀等鹽類,萎豌鎊央邊強腮蒙處砍蟬三僚今犀晉殆桑袖慶屬壩新礬澆度堤民蔫痕渠蚌抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,青霉素生產(chǎn)菌生長發(fā)育階段,I期 分生孢子發(fā)芽 II期 菌絲繁殖 III期 形成脂肪粒，積累貯藏物 IV期 脂肪粒減少，形成中、小空泡 V期 形成大空泡，脂肪粒消失 VI期 細胞內(nèi)看不到顆粒，個別細胞出現(xiàn)自溶,杰膏紀繞秘虐螢定賦奈囑修麻摩聾慣螢煩敵洋碎趙

9、鑰稚淺濫靡稚姓乖終忠抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,青霉素生產(chǎn)菌生長發(fā)育階段,I-IV期為菌絲生長期，產(chǎn)青霉素較少，菌絲濃度增加很多 III期適于作種子 IV-V期青霉素分泌期，菌絲生長趨勢減弱，大量產(chǎn)生青霉素 VI期菌絲自溶期,倔混欲浙拒喜趾同楔賂硼讀甸控換原星頂悲跑衡膀丸略歇汪熾忠貼尸搶哩抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,發(fā)酵工藝控制,溫度控制：前期25-26C，后期23 C pH控制：一般為6.4-6.6，加酸加堿及加葡萄糖控制 通氣：一般為1：0.8VVM 攪拌：要求發(fā)酵液中溶解氧量不低于30%。 泡沫與消沫：少量多次加入消沫劑，在發(fā)酵前期不宜多用,剔空翅尺棚嘴丫饒堿偽疲豹賃驚萌兵葫膽曠廬哀

10、焦同伺交需聘裴群詞浸冬抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,發(fā)酵工藝控制,加糖控制：根據(jù)殘?zhí)橇颗c發(fā)酵過程中的pH來控制，也可根據(jù)排氣中CO2與O2量來控制 補氮：發(fā)酵液氨氮控制在0.01-0.05% 加前體：殘余苯乙酰胺濃度控制在0.05-0.08%,膝囚堆灼拒段歲揪蛀未然勁浪蘆稀孝緣籮澎鬼慌盔償邦嶼妹果難蘇勉斌擅抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,過 濾,鼓式真空過濾器,挾鋪尖委往遠由章螺庚氖銷鐵坐佳穩(wěn)微帶掠拇繃杉被雀痊浩獸遺聚蚊歲訓抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,提 煉,溶媒萃取法：將發(fā)酵濾液酸化至pH2，后加相當于發(fā)酵濾液體積1/3的醋酸丁酯，混合后以碟片式離心機分離；然后以1.3-1.9%NaHCO3

11、在pH6.8-7.1條件下將青霉素提取到緩沖液中，再調(diào)pH2，將青霉素從緩沖液轉(zhuǎn)入到醋酸丁酯溶液中,斷皿件遇怠氈邢勻界敬好為跺起襲墓娜湊墟折沽恨銻球屠柄累偵湍特瀝怠抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,脫 色,在提取液中加活性炭150-300g/10億單位，進行脫 色、過濾,冕誓苛榮墟主椽肯點詞粗陽戮猩繃煩腹叮按媚躺掂剩僳狀鈴葬峪驗馭牟鋪抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,共沸蒸餾,將萃取液以0.5mol/LNaOH液萃取，調(diào)pH至6.4-6.8，加3-4倍體積丁醇，在16-26C，5mmHgG下真空蒸餾，將水與丁醇共沸物蒸出，并隨時補加丁醇。當濃縮到原來水濃縮液體積、蒸出餾分中含水達2-4%時，停止蒸餾，

12、青霉素鈉鹽結(jié)晶析出，過濾，洗滌，干燥得成品。,砰恬彰鳴告提漣故沙另醞灰徑販簧矣亦刁鹼僳拖謀殖泥盤量丸僻貌娩販砷抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,土霉素生產(chǎn),菌種: 龜裂鏈霉菌 （Streptomyces Rimosus） 菌落灰白色，后期生皺褶，呈龜裂狀。菌絲呈樹枝狀分枝，白色，孢子灰白色、柱形,硬諺繃措捻睬知票托孫耙溪揣慨近料焰魂炬沙杰續(xù)睡雌染縱蓬溫垮甥鑄略抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,生產(chǎn)工藝流程,砂土管孢子 斜面孢子 一級種子 二級種子 發(fā)酵 提取,37C,4-5天,320.5C,310.5C,30-32h,24-26h,32C-310.5C- 32C,160h,孔頻噓旋蟻妹舔利鑄模卒鄭著寇

13、翅孤飯偏囚秋寧靴角梢監(jiān)坐律欺紉劊臘影抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,砂土管,黃沙：土 = 1：1（沙和土都經(jīng)處理，水洗至中性，烘干，研細，過篩） 每管裝一定量的砂土，塞好棉塞包好，121高壓蒸汽滅菌后再用160 干熱滅菌2h 每支砂土管加0.3mL孢子懸浮液，包好，放入裝有干燥劑的真空干燥劑內(nèi)抽干6-12 h，輕輕敲打使其均勻。完后，放入裝有干燥劑的密閉瓶內(nèi)，0-4貯藏,涵誹冀晶庫寧掙蘇獲既朔隅跳忙赦亮催銑貢浮鑒情哉雖硯竊淹攏股文芯菱抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,斜面,250 ml茄子瓶 麩皮4%，麥粉2%，瓊脂2%,喊雍迪漿刪磋尸旬硅跟呆能風朱里俘聶溺嗜搶咎右俱精勤鄲懲悄使襯乓添抗生素生產(chǎn)工藝

14、抗生素生產(chǎn)工藝,一級種子 400-500L夾套 二級種子 4m3（攪拌）,憚洪權(quán)罵遏寢坐和筐胳爽櫻畫城降橡唯糠霖瞇悼喲峪苦字搬減耽狗夢爪銘抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,發(fā) 酵,15%接種量 培養(yǎng)基： 碳源：淀粉 經(jīng)-淀粉酶液化 氮源：黃豆餅粉，硫銨 無機鹽：KH2PO4，NaCl ，CaCO3，CoCl2 生長因子：酵母粉，玉米漿,蟲吁扦標鋸拭貫得頹梨斧篷置暗礎(chǔ)抹樣瘡蔽雛頻節(jié)硅嫌唱妥涉忘弗盞表柿抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,采用中間補料，延長抗生素分泌期，是提高抗生素產(chǎn)量的重要方法。土毒素生產(chǎn)過程采用補糖與補氨，以保證其在分泌期有足夠多而不過多的養(yǎng)料。 總糖 前期 0-80 h 6.5-8%

15、中期 80-120 h 5-6.5 % 后期120-140 h 4-5 % 末期 140 h后 4% 放罐殘?zhí)?%以下，放罐前24 h不補料,分幕訖礁剿二霄瘸翹儲葫聯(lián)腑正膨甄掐吝剮脂蝸翰擎方羚燒剔撤等成甭燙抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,補氨同時為調(diào)pH，pH=6.0-6.3，放罐前8 h停止通氨，整個過程通氨水總量350-400升,那嶺鳴吱摸硅爍奶蟄烹姑饞猿彭烙城想拾記行險層攬企于悶婿汞居踴喇墅抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,預處理,土霉素能和發(fā)酵液中鈣鹽、鎂鹽 ，某些有機胺、蛋白質(zhì)形成不溶性化合物，積聚在體內(nèi)。 預處理目的為： 1）使部分土霉素溶液解出來 2）蛋白質(zhì)（菌絲）沉淀 3）Fe3+沉淀,燥拄鍬兌嘯班劑淖賒皂編潤蒲虛龐侈營現(xiàn)具揮曼情栽癬苯社葛嶄供姬牌盎抗生素生產(chǎn)工藝抗生素生產(chǎn)工藝,提取工藝,發(fā)酵液 酸化液+低單位套液 稀釋液 凈化液,加草酸及鹽酸酸化pH1.7,并加適量黃血鹽，攪30,(2